复旦大学附属中山医院检验科主任潘柏申教授就此强调，检验科、内分泌科、骨科、妇产科等相关科室的临床人员亟需重视维生素D检测的标准化问题。
公开数据显示，全球超过10亿人患有维生素D缺乏症，近2亿女性患有骨质疏松症，60～70岁女性中接近1/3的人为骨质疏松症患者，80岁以上女性的这一患病比例高达2/3。目前，医学专家达成的共识是：对于可能从维生素D定期检测中受益的高风险人群，维生素D检测应于基线和3个月间隔进行，直至获得理想的治疗浓度；基于维生素D代谢与反应的高多样性，以及患者的剂量依赖性，有效测定维生素D浓度可使剂量个体化，并增强患者的治疗依从性。
目前，临床上对 VIT D 的状态分类主要包括缺乏、不足与毒性浓度三类，大多数检验医生建议：若 Vit D 与血清 25(OH)D 值相关性 <10 ng/mL，可判定为 Vit D 缺乏；若二值相关性接近 10-20 ng/mL，则说明 Vit D 不足；当达到 100ng/mL，可判断为 Vit D 毒性的上限。国际骨质疏松基金会（IOF）建议骨松患者维生素 D 水平补充到 30ng/mL 以上。而具体实践中，Vit D 参考区间与临床临界值应根据纬度、人种、疾病而有所不同。
因 Vit D 浓度存在较大个体差异，患者补充 Vit D 治疗期间及之前，均须进行 25(OH)D 测定，确保获得最佳浓度。作为检测标本，25(OH)D 在血清中具有良好的稳定性，在室温条件下至少可保持 24 小时，37℃时稳定期可长达一周，甚至在反复冷冻、解冻 5 次后，结构与浓度仍能维持稳定状态；且运输中，血清标本无需冷冻，3 天内均可选用全血。25 (OH)D 检测被认为是理想的用于评估 Vit D 状态的标志物。
目前，常用的 Vit D 检测方法主要包括放射免疫分析法、Vit D 结合蛋白分析法、化学发光法、高效液相色谱法（HPLC） 和液相色谱 - 质谱法（LC-MS/MS）等。 HPLC 和 LC-MS/MS 检测结果准确可靠，可分别检测 25(OH)D2 和 25(OH)D3，但仪器昂贵，且技术要求高，操作需培训，其检测速度不适于大批量的临床标本。
因此，临床多用免疫化学发光法检测 25(OH)D，无需萃取步骤和色谱分析。目前自动化检测 25(OH)D 的主要难点是如何将 25(OH)D 与 VDBP 解离，使用有机试剂的方式使 25(OH)D 解离对大多数自动免疫化学分析或蛋白结合分析不适合，采用其他解离方式难以确定在自动化检测方式中的解离程度是否足够有效。
值得注意的是，免疫化学发光法检测时采用的相应抗体，也可识别其他 Vit D 衍生物，导致检测结果可能包含其他 Vit D 衍生物，且无法全部分辨出 25(OH)D3 和 25(OH)D2，对补充 25(OH)D2 的患者的结果分析时应特别注意。并不是每一种 25(OH)D 自动化检测方法都适合于所有患者，大部分免疫分析难以准确检测低浓度 25(OH)D（小于 8 mg/L，20 nmol/L）。
荷兰的 Heijboer 等对 6 种 常规的 Vit D 检测方法（包括 5 种自动化检验方法：Architect、Centaur、iSYS、LiaISOn 和 Elecsys 以及 1 种萃取后放免法 RIA）与同位素稀释 / 在线固相萃取液相色谱 / 串联质谱法（ID-XLC-MS/MS）做了对比，发现一些 25(OH)D 检测方法是不够准确的，与 ID-XLC-MS/MS 法检测结果之间有显著的偏差。这些不精确性是由于 VDBP 以及其他一些仍然未知的干扰因素造成的。
目前，自动化检测法的主要难点是将25(OH)D与维生素结合蛋白解离。使用有机试剂进行解离不适用于大多数自动免疫化学分析法和蛋白结合分析法，采用其他解离方法又难以确定在自动化检测中的解离程度。而免疫化学发光法所采用的相关抗体会识别其他维生素D衍生物，易导致检测结果涵盖其他维生素D衍生物的分析数据，且大部分免疫分析法是难以准确检测低浓度(小于8毫克/升，20纳摩尔/升)25(OH)D的。荷兰科研人员Emmen等在3家检测机构进行了Elecsys检测法、LC-MS/MS法、HPLC法以及Liaison法检测25(OH)D的不精密度、线性回归和功能敏感性分析。结果显示，Elecsys检测法与LC-MS/MS检测法之间的结果一致性好，批内精密度≤6%，批间精密度≤8%，几乎不受维生素结合蛋白浓度影响，且检测方法经济、方便，可满足维生素D检测质量控制计划要求，并可帮助医学实验室提高诊断效率。
因此，当解读 25(OH)D 检测结果时，需要慎重考虑检测方法。临床医生应特别重视检测的标准化和一致性。对于可从 Vit D 检测受益的高风险人群，专家已达成共识，Vit D 检测应于基线及 3 个月间隔期进行，直至获得理想浓度。基于 Vit D 代谢与反应的高度多样性，以及患者接受与获得的剂量依赖性作用记录，有效进行 Vit D 浓度测定可使剂量个性化，并增强患者治疗依从性。
荷兰的 Emmen 等进行的多中心研究在 3 家检测机构中比较了罗氏 Elecsys 检测法、LC-MS/MS 法、HPLC 法以及 Liaison 的 25(OH)D 检测法的不精密度、线性回归分析和功能敏感性。
研究显示，罗氏 Elecsys 检测与金标准 LC-MS/MS 检测方法间的结果一致性非常好。其批内精密度≤6%，批间精密度≤8%，一致性良好，几乎不受 VDBP 浓度影响，且经济方便，满足 Vit D 质量控制计划要求，可有效帮助实验室提高诊断效率。
