唐卓课题组向Gap-LCR探针中引入了一条短的功能DNA序列(DNAzyme),进而避免了对探针的化学修饰;然后利用两种核酸外切酶依次降解体系中没有发生连接反应的磷酸化探针和释放Gap-LCR扩增产物中的DNAzyme序列;最后利用DNAzyme与卟啉铁(hemin)或者卟啉铁类似物的结合物具有类似于过氧化物酶活性的性质,催化H202氧化底物(ABTS,盐酸酪胺等)成有色或者能产生荧光信号的物质,直接在室温下通过颜色或者荧光信号变化来进行检测。最终,研究人员获得了一种具有高灵敏度和专一性的SNP检测技术,检测限达到1000分子,同时能够从100000个干扰分子中检测到一个目标分子。
此研究验证了方法的灵敏度、专一性以及通用性。研究人员成功地将检测技术应用到血液DNA样本中新生儿耳聋基因最常见的突变位点GJB2 235delC位点的检测。
相关研究结果发表在期刊Biosensors and Bioelectronics.