2013年6月10日,赛默飞世尔科技公司在正在美国召开的ASMS 2013上推出融合三种类型质量分析器的创新“三合一(Tribird)”质谱系统OrbITrap Fusion LC-MS。该质谱系统集成了四极杆、轨道阱(Orbitrap)及线性离子阱(LIT),其可以为复杂生物样品分析提供前所未有的深度。
Orbitrap Fusion LC-MS系统
“我们的使命是创造最高性能的商业化质谱仪”,赛默飞世尔科技色谱质谱部首席技术官Ian Jardine博士如是说,“此外,我们希望这一有力工具能够广泛应用到科学界且确保该仪器易于使用。在设计Orbitrap Fusion时,我们在一个灵活的研究级质谱系统中组合了四极杆、线性离子阱和Orbitrap技术并提高了其性能—以获得可能革新客户研究的新一代质谱仪。”
“我们最大的挑战是灵敏度和分析通量,”哈佛医学院细胞生物学教授Steven Gygi博士如是说,“Orbitrap Fusion仪器的革新性,允许我们以大大超过以往的定量准确度获得更宽广的蛋白质组学覆盖范围。”
Orbitrap Fusion系统解决通量问题的一个方法是通过串联质量标签(TMT)。该技术能够使质谱仪同时对多个样品中的蛋白质进行相对定量研究。与先前的工具相比,Orbitrap Fusion仪器显著改善了数据的深度和质量,从而获得更为出色的TMT结果。新平台借助 MS3 选择性的优势提高定量准确度,而且较之以往的分析系统,在单位时间内可获取两倍的MS3扫描次数,且灵敏度也获得显著提升。用户也可以从赛默飞世尔科技处订购全新TMT试剂,最多可同时对10个样品进行全面分析。
Orbitrap Fusion LC-MS的核心是配置三个不同的质量分析器,这些分析器共同协作,将分析性能提升至全新的高度,从而实现全新的实验方法:
(1)四极杆用于进行母离子选择,分辨率最低可达0.4amu,具有出色的灵敏度和选择性;
(2) 超高场Orbitrap提供超过450,000的分辨率和高达15 Hz的扫描速率,具有无法逾越的分析选择性和速度;
(3)多级杆离子回旋通道及双压线性离子阱提供 MSn HCD、CID 和 ETD 裂解,可在最高达20 Hz的扫描速度下进行快速、灵敏的质量数分析。同步的母离子选择增强了仪器的信噪比。
三合一配置使用户能够以比现有的商业化仪器更快的速度识别更多的低丰度蛋白质。其独特的结构能够在Orbitrap和线性离子阱质量分析器中实现同时的母离子隔离、裂解和数据采集。与已有仪器相比,所采集得到的数据质量更高,扩展了可能的实验范围。
可在任意MSn分析阶段选择不同裂解模式并以Orbitrap或线性离子阱分析器检测的能力使得一系列新型实验成为可能,从而能够获取来自代谢物、多聚糖、翻译后修饰和序列多态性方面的全新水平的结构信息。
在典型代谢组学实验中,科研人员经常会面临未知物和目标化合物。为了识别未知物,必须在LC-线性离子阱仪器上重新运行样品以获取MSn数据,但在第二次运行时匹配色谱保留时间会比较困难,进而导致了不确定性。利用其独特的三合一质量分析器配置,新型Orbitrap Fusion Tribrid LC-MS克服了这一问题,通过确凿的未知物鉴定结果为用户提供革新众多小分子实验方法的能力。
性能易于实现
Orbitrap Fusion LC-MS的新型智能软件提供了动态扫描管理(Dynamic Scan Management,DSM),具有随实验自动调整扫描参数以获得最佳结果的能力。
Orbitrap Fusion系统集成了一个新型、易于使用的拖放式方法编辑器,避免在创建复杂方法过程中需要花费大量时间进行参数的猜测和尝试。该编辑器是MS软件套件中的一部分,支持该平台无可比拟的适用性。其包括:
(1) Thermo Scientific Freestyle软件,一个新型数据可视化工具,也有助于进行快速方法开发和数据质量评估。
(2) Thermo Scientific Proteome Discoverer,一个用于蛋白质识别的综合性软件程序。
(3)Thermo Scientific Compound Discoverer软件,用于在大量应用中执行小分子结构识别。
(4) Thermo Scientific SIEVE软件用于蛋白质组学和小分子样品的差异定量分析。
(5)mzCloud软件,一个支持未知物识别和结构解析的新型质谱库。