核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分，参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄引起体代谢紊乱。其症状：轻则表现为生长受阻，生产力下降，严重者，猪发生皮炎，形成痂皮及脓肿，眼结膜、角膜炎;母畜缺乏则出现早产，胚胎死亡及胎儿畸形;雏鸡的典型症状为足跟关节肿胀，趾内向弯曲成拳状，急性缺乏症能使腿部完全麻痹、瘫痪;种鸡缺乏时，种蛋孵化率低，雏鸡成活率低。

赛智科技参考国标(GB/T 14701-2002)，利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检测可提供饲料中维生素B2的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素B2的测定，仅供广大用户参考。

以下是高效液相色谱法对饲料中维生素B2的详细检测方法。

1　 仪器与试剂1.1 仪器、设备

LC-10Tvp高效液相色谱仪

Vertex 色谱柱：150mm×4.6mm×5μm;

分析天平;

恒温水浴锅;

针头过滤器。

1.2 试剂

乙二胺四乙酸二钠(EDTA)

庚烷磺酸钠

冰乙酸

三乙胺

甲醇

维生素B2标准工作液2　 试样溶液的制备

称取维生素预混合饲料0.25g-0.5g，于100ml棕色容量瓶中，加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min，待冷却后加入14ml甲醇，用提取液定容至刻度，混匀，过滤。维生素预混合饲料样液需有提取液进一步5倍-10倍，取部分过滤液过0.45μm滤膜过滤，高效液相色谱仪分析。

3　 色谱条件

色谱柱：Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm;

流速：1.0mL/min;

温度：室温;

进样量：20μL;

检测波长：单检维生素B2为267nm，多种维生素联检为280nm。

流动相：在已装入700ml去离子水的1000ml容量瓶中，加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸钠，待全溶解后，加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺，用去离子水定容至刻度摇匀。用冰乙酸、三乙胺调解pH至3.4±0.02，过0.45μm滤膜，取该溶液860ml与140ml甲醇混合，超声脱气，待用。