1 仪器及材料 )qzJu*c
Q 仪器:Agilent GC-MS 7890-5975c;涡旋混合器;氮吹仪; .Uh-Wi[ 玻璃器皿:10mL样品瓶;容量瓶;进样样品瓶;带刻度试管。 s%H5Qa+Uh 材料及试剂:氨基甲酸乙酯专用净化柱;氨基甲酸乙酯标准品;PTFE滤膜;二氯甲烷、甲醇均为色谱纯;无水硫酸钠(经600度煅烧)。 <Zl0$~B:5 2 标准溶液配制 6!+xf 准确称取约0.1g(精确至0.0001g)氨基甲酸乙酯标准品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到标准储备液。用甲醇逐级稀释储备液,得到20、10、5、1、0.1、0.05(单位为μg/mL)标准溶液,用于绘制标准曲线。同时稀释得到标准工作液0.4LINK1">
μg/mL、4μg/mL、40μg/mL,用于进行加标回收率实验。 :>F:G%(DK 3 GC-MS操作条件
nUs) 3.1 GC条件 L((z;y>q| 毛细柱DA-INOWAX(30m*0.25mm*0.25um);进样口温度230℃;载气:高纯氦气;流速1ml/min;程序升温:60℃(5min)3.5℃/min 150;不分流进样,进样量1μL。 uQ5NN*C= 3.2 MS条件 '+f!(teLz 接口温度:240℃,电离方式:EI,电子能量:70eV,离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃;扫描模式:SIM模式,监测离子:62,74,89,其中定量离子为62. tN3Xn] 4 样品处理 J4 !Z,- 4.1 黄酒加标样品 xDRK^nmC 称取2g黄酒于10mL样品瓶中,加入标准工作液50μL,涡旋混合均匀,将样品载入到净化柱上,静置10min以保证黄酒样品和填料充分湿润。然后用12mL二氯甲烷洗脱,用流速调节阀控制流速为2 mL/min左右,用带刻度试管收集洗脱液,将洗脱液在30℃下氮吹至1mL(若体积小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量无水硫酸钠,静置5min,用PTFE滤膜进行过滤,收集,取少量入进样样品瓶,待测。 4JU#3 4.2 黄酒样品 v:JFUn} 称取2g黄酒,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 azj<aaH 4.3 空白样品 )Qw|)='- 称取2g去离子水,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 ~
Z%>N r/:9j(y
xr 5 实验结果 G1$DVGo 色谱图 "%,zB_ng\< 将处理得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,得到的色谱图如图1~图3. *5*d8;@> >
'Y] C\ 图1 标准溶液色谱图(浓度为0.2μg/mL) *AZC{jP FIC
2) 图2 黄酒样品加标色谱图(定容浓度为0.2μg/mL)
\-V jUW{Z@{U 图3 黄酒样品色谱图 !Aj_r^[X` 标准曲线 R^%7
| 将步骤(2)配制的标准溶液,在仪器条件(3)下进行检测,绘制标准曲线,得到线性方程为y=2.19e+005*x+4.40e+003(相关系数为0.999),其中y为峰面积,x为目标物浓度(μg/mL),方法检出限为3ng/mL,定量限为10ng/mL SJy:5e?zk 加标回收率及精密度 @-!w,$F)%d 称取17份2g酒样,其中5份分别加入浓度为0.4μg/mL标准工作液50μL,5份分别加入浓度为4μg/mL标准工作液50μL,另外5份分别加入浓度为40μg/mL标准工作液50μL,余下2份酒样作为空白,在条件(4)下进行样品处理,将得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,结果如表1所示。表1 加标回收率及精密度
X1tAV>k5'L 计算公式 /+02BP "xnek8F 样品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)计算:X=(C1-C2)*V/m…………………………..(1)
- Npl x 式中:C1为试样中氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL; =0x[Sa$&, C2为空白试样氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL;V为试样最终定容体积,单位为mL; rpDH>Hzq m为称取试样的质量,单位为g。 RFQa9Rxk 6 结论 #l8CUg~Uj 实验结果表明,该净化柱对氨基甲酸乙酯能有较好的回收率,同时,使用净化柱能较好的去除酒中的氨基酸、蛋白质、糖、有机酸等干扰成分。该方法洗脱剂用量仅为12mL,实验操作快速、简便,可应用于大批量样品的前处理。 }ndH |,