1 仪器及材料 {A}T^q!m] 仪器:Agilent GC-MS 7890-5975c;涡旋混合器;氮吹仪; !d##q)D
f? 玻璃器皿:10mL样品瓶;容量瓶;进样样品瓶;带刻度试管。 ejg!1*H@n 材料及试剂:氨基甲酸乙酯专用净化柱;氨基甲酸乙酯标准品;PTFE滤膜;二氯甲烷、甲醇均为色谱纯;无水硫酸钠(经600度煅烧)。 u9_?c
G- 2 标准溶液配制 Ez
<YD 准确称取约0.1g(精确至0.0001g)氨基甲酸乙酯标准品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到标准储备液。用甲醇逐级稀释储备液,得到20、10、5、1、0.1、0.05(单位为μg/mL)标准溶液,用于绘制标准曲线。同时稀释得到标准工作液0.4LINK1">
μg/mL、4μg/mL、40μg/mL,用于进行加标回收率实验。 CS%ut-K<5M 3 GC-MS操作条件 6\h*SBI?( 3.1 GC条件 >U:-U"rA? 毛细柱DA-INOWAX(30m*0.25mm*0.25um);进样口温度230℃;载气:高纯氦气;流速1ml/min;程序升温:60℃(5min)3.5℃/min 150;不分流进样,进样量1μL。 dn5t7D^x 3.2 MS条件 *eAt ' 接口温度:240℃,电离方式:EI,电子能量:70eV,离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃;扫描模式:SIM模式,监测离子:62,74,89,其中定量离子为62. iA2TvP# 4 样品处理 f+Bv8 g 4.1 黄酒加标样品 b<g9L4s 称取2g黄酒于10mL样品瓶中,加入标准工作液50μL,涡旋混合均匀,将样品载入到净化柱上,静置10min以保证黄酒样品和填料充分湿润。然后用12mL二氯甲烷洗脱,用流速调节阀控制流速为2 mL/min左右,用带刻度试管收集洗脱液,将洗脱液在30℃下氮吹至1mL(若体积小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量无水硫酸钠,静置5min,用PTFE滤膜进行过滤,收集,取少量入进样样品瓶,待测。 kEdAt5/U{ 4.2 黄酒样品 b;e*`f8T3c 称取2g黄酒,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 pL'+sW 4.3 空白样品 20RI S j 称取2g去离子水,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 u"1Zv! T|Fl$is 5 实验结果 qUtlh,4) 色谱图 .:=G=v=1 将处理得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,得到的色谱图如图1~图3. o79EDPX
*Z,?VEO 图1 标准溶液色谱图(浓度为0.2μg/mL) (W4H?u@X0
/I/gbmc) 图2 黄酒样品加标色谱图(定容浓度为0.2μg/mL) [uD G;We=
+XP9=U*g 图3 黄酒样品色谱图 %!r@l7< 标准曲线 O~
]3 .b 将步骤(2)配制的标准溶液,在仪器条件(3)下进行检测,绘制标准曲线,得到线性方程为y=2.19e+005*x+4.40e+003(相关系数为0.999),其中y为峰面积,x为目标物浓度(μg/mL),方法检出限为3ng/mL,定量限为10ng/mL QDdH5EfY 加标回收率及精密度 QopA'm 称取17份2g酒样,其中5份分别加入浓度为0.4μg/mL标准工作液50μL,5份分别加入浓度为4μg/mL标准工作液50μL,另外5份分别加入浓度为40μg/mL标准工作液50μL,余下2份酒样作为空白,在条件(4)下进行样品处理,将得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,结果如表1所示。表1 加标回收率及精密度
>%1mx\y^ 计算公式 'D &[Y)f^ >#[,OU} N 样品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)计算:X=(C1-C2)*V/m…………………………..(1)
Pe?=M[u2 式中:C1为试样中氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL; !(nFq9~~Q C2为空白试样氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL;V为试样最终定容体积,单位为mL; , .]1N:
m为称取试样的质量,单位为g。 Lpv,6#m`) 6 结论 EZJ[+ -Q; 实验结果表明,该净化柱对氨基甲酸乙酯能有较好的回收率,同时,使用净化柱能较好的去除酒中的氨基酸、蛋白质、糖、有机酸等干扰成分。该方法洗脱剂用量仅为12mL,实验操作快速、简便,可应用于大批量样品的前处理。 w^E$R