1 仪器及材料 ~x+Ykq0 仪器:Agilent GC-MS 7890-5975c;涡旋混合器;氮吹仪; jlRS:$|R0 玻璃器皿:10mL样品瓶;容量瓶;进样样品瓶;带刻度试管。 x[}06k' 材料及试剂:氨基甲酸乙酯专用净化柱;氨基甲酸乙酯标准品;PTFE滤膜;二氯甲烷、甲醇均为色谱纯;无水硫酸钠(经600度煅烧)。 %QE5<2k 2 标准溶液配制 xc*!W*04 准确称取约0.1g(精确至0.0001g)氨基甲酸乙酯标准品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到标准储备液。用甲醇逐级稀释储备液,得到20、10、5、1、0.1、0.05(单位为μg/mL)标准溶液,用于绘制标准曲线。同时稀释得到标准工作液0.4LINK1">
μg/mL、4μg/mL、40μg/mL,用于进行加标回收率实验。 <"NyC?b+G 3 GC-MS操作条件 4d6%
t2 3.1 GC条件 I
W8. 毛细柱DA-INOWAX(30m*0.25mm*0.25um);进样口温度230℃;载气:高纯氦气;流速1ml/min;程序升温:60℃(5min)3.5℃/min 150;不分流进样,进样量1μL。 +QQYPEx+ 3.2 MS条件 o>$|SU!a 接口温度:240℃,电离方式:EI,电子能量:70eV,离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃;扫描模式:SIM模式,监测离子:62,74,89,其中定量离子为62. )j(fWshP 4 样品处理 "h`54}0 4.1 黄酒加标样品 /W? z0tk` 称取2g黄酒于10mL样品瓶中,加入标准工作液50μL,涡旋混合均匀,将样品载入到净化柱上,静置10min以保证黄酒样品和填料充分湿润。然后用12mL二氯甲烷洗脱,用流速调节阀控制流速为2 mL/min左右,用带刻度试管收集洗脱液,将洗脱液在30℃下氮吹至1mL(若体积小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量无水硫酸钠,静置5min,用PTFE滤膜进行过滤,收集,取少量入进样样品瓶,待测。 u
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AQl.u 4.2 黄酒样品 7s$6XO! 称取2g黄酒,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 <XY;fhnB 4.3 空白样品 f>?^uSpWH 称取2g去离子水,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 /bu'6/!` nq),VPJi 5 实验结果 u~
VswXc4 色谱图
kT>r<`rt 将处理得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,得到的色谱图如图1~图3. ,^n-L&
:~WPY9i` 图1 标准溶液色谱图(浓度为0.2μg/mL) &NlS =
782[yLyv 图2 黄酒样品加标色谱图(定容浓度为0.2μg/mL) Z TN:|IKT
M@',3 图3 黄酒样品色谱图 i5ajM,i/K 标准曲线 CsJ)Z%4_ 将步骤(2)配制的标准溶液,在仪器条件(3)下进行检测,绘制标准曲线,得到线性方程为y=2.19e+005*x+4.40e+003(相关系数为0.999),其中y为峰面积,x为目标物浓度(μg/mL),方法检出限为3ng/mL,定量限为10ng/mL bd@*vu}?} 加标回收率及精密度 [Ihp\!xqI 称取17份2g酒样,其中5份分别加入浓度为0.4μg/mL标准工作液50μL,5份分别加入浓度为4μg/mL标准工作液50μL,另外5份分别加入浓度为40μg/mL标准工作液50μL,余下2份酒样作为空白,在条件(4)下进行样品处理,将得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,结果如表1所示。表1 加标回收率及精密度
N#<zEAB 计算公式 x.0k%H
o2[vM$] 样品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)计算:X=(C1-C2)*V/m…………………………..(1)
<3i4NXnL2 式中:C1为试样中氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL; el2*\(XT C2为空白试样氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL;V为试样最终定容体积,单位为mL; @%I_&!d m为称取试样的质量,单位为g。 l|R<F;| 6 结论 7yqSt)/U 实验结果表明,该净化柱对氨基甲酸乙酯能有较好的回收率,同时,使用净化柱能较好的去除酒中的氨基酸、蛋白质、糖、有机酸等干扰成分。该方法洗脱剂用量仅为12mL,实验操作快速、简便,可应用于大批量样品的前处理。 Zq\RNZ}