三聚氰胺分析方法包组件清单 [复制链接]

包括： SN'LUwaMp!  
1. Venusil ASB-C18或ASB-C8色谱柱或XBP-C8色谱柱（4.6*250mm,5μm,150Å）任选1支   xUzSS@ot^  
2. 混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支/盒，3盒 Xt/muV  
以上2项均为科技部“十一五”国家支撑计划成果 VWmZ|9Ri  
3. 三聚氰胺标准品1瓶（250mg，≥99.5%） rBkf@  
4. 真空固相萃取装置（12位） *Rj>// A  
5. 0.22μm，13mm Nylon针式过滤器过滤 200个/包 TjlKy  
6. 三聚氰胺分析方法手册1份 JMOQDo  
7. 庚烷磺酸钠（10g/瓶），高纯甲醇、乙睛 uyxU>yHV<g  
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* 试剂规格请以签订合同时为准，博纳艾杰尔科技拥有最终解释权。 sN7I~  
1 固相萃取(SPE)柱的选择： * "ER8\  
三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点： x"v5'EpL  
1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。 T2}I,{U  
2) 批次重复性好。 -^$CGRE6A  
3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。 wQp,RpM  
2 样品前处理步骤： 6k42>e*p  
2.1标准样品配制： {mw,U[C  
取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以合适溶液稀释至所要的浓度。 p2!x8`IB*  
2.2提取： |>A1J:  
称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10mL)，加入50mL 1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)，同时处理多个样品，需要用真空固相萃取装置（12位），可达到方便、快速、高通量分析样品的目的。 Nb #E+\q  
2.3净化(PCX小柱，60mg/3mL) ： ZGzrh`j{-  
1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水 Q2^}NQO=  
2) 上样：加入提取液3mL ~{Tus.jk  
3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。 0d`s(b54;O  
4) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。 /%Rz`}  
5) 浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至1mL。 X LA  
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2.4检测：HPLC-UV检测方法 x~j
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k-Jj k3  
三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局（FDA）的三聚氰胺检测方法和中国农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列和Venusil XBP色谱柱，均能得到良好的结果，分析色谱图如下：1、 三聚氰胺的FDA检测方法 F{
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色谱柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm 2ztP'  
缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0。 o8 q@rwu3  
流动相：缓冲液：乙腈= 85：15 j@ UIN3  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10μL， Z7K;~*  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤 3PpycJ}  
流 速：1.0mL / min $khWu>b  
柱 温：40 ℃ Rl.3p<sX  
波 长：240nm T.`EDluG  
2、三聚氰胺的中国农业部颁标准检测方法 L UHj3H  
（1）色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm dE
.R$SM  
缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM庚烷磺酸钠 i0v;mc  
流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15 3-lJ]7OT  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL ?`uY*+u  
进样前用 0.22μm针式过滤器过滤 QPg QM6  
流 速：1.0mL/min c]
$X+  
柱 温：40℃ =A$5~op%  
B~D{p t3y  
波 长：240nm I ^?TabL  
（2）色谱柱：Venusil XBP-C8 4.6×250mm缓冲液：10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠 Qo4]_,kR  
流动相：缓冲液：乙腈=85：15进样量：样品用缓冲溶液溶解成约0.1mg/ml，进10μL S*Qip,u  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤流速：1.0mL/min [ %cW ?@  
柱温：20℃波长：240nm |F=!0Id<  
Rt＜10minLC-MS参考方法 B5GT^DaT  
由于HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，限制了液质联用方法的使用；但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，没有良好的保留与分离。源于此问题，博纳艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用博纳艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离，参考方法如下： oM G8?p  
缓冲液：10mM NH4AC流动相：缓冲液：ACN=95：5 x4r8^,K3Zn  
流 速：1.0mL/min进样量：先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10μL %PRG;k R  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤柱温：40℃ X;lL$  
波长：240nm PIR#M('  
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