高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺方法的改进 [复制链接]

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1．2环磷酰胺内标液：取环磷酰胺对照品0.2g于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为2mg·mL^-1的内标溶液，于冰箱4℃ 保存。 R1?LB"aN  
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1）柱活化：依次用2mL乙腈，再用2mL生理盐水活化小柱 l1 UN.l'p  
2）上样：把处理好的样品过柱 \Z8:^ct.P  
3）淋洗：待血样完全流出后，先用1mL生理盐水冲洗，再用1mL 5%乙腈进一步冲洗杂质，待淋洗液完全流出后，加压将柱抽干 y^}00Z+l  
4）洗脱：用0.5mL乙腈洗脱，收集洗脱液，取20μL进样测定。 6b-E|;"]:^  
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4．结果 /SKgN{tWe  

T:0#se   加入浓度（μg·mL-1）	8m*uT< 5D   提取回收率（%）	&XZS}n   方法回收率（%）	~L?q.*q   RSD（%）
			r 8TNl@Z   日内	aP`V      日间
;To][ J   100	DcX,o*ec!   92.0±1.8	{ i|$^A3   101.2±3.5	-=VGXd   1.1
]x^v;r~   50	b&xlT+GN   93.6±5.6	m\;@~o'k   107.2±1.5	[RFF&uy   2.9
KQ2jeJ/pj   5	cUK 9EOPe   89.3±1.3	AD4Ot5   95.3±4.3	%:vMD   2.2

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色谱图见图1。保留时间：异环磷酰胺11.6min；环磷酰胺12.8min，峰形良好，无杂质峰干扰。 I'>r  
色谱条件 ?R8wmE[w  
色谱柱：Zorbox-ODS C₁₈ (4.6mm×250mm,5μm) :$?^ID  
流动相：乙腈-水（25：75） ~.L\f%<  
流速1mL·min^-1；检测波长200nm，进样量为20μL；柱温：室温