高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺方法的改进 [复制链接]

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1．2环磷酰胺内标液：取环磷酰胺对照品0.2g于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为2mg·mL^-1的内标溶液，于冰箱4℃ 保存。 n*4N%yI^m5  
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1）柱活化：依次用2mL乙腈，再用2mL生理盐水活化小柱 Rwy<#9R[x  
2）上样：把处理好的样品过柱 ~MvLrg"i  
3）淋洗：待血样完全流出后，先用1mL生理盐水冲洗，再用1mL 5%乙腈进一步冲洗杂质，待淋洗液完全流出后，加压将柱抽干 vFKt=o$ g  
4）洗脱：用0.5mL乙腈洗脱，收集洗脱液，取20μL进样测定。 oEqt7l[I{  
UUxDW3K  
4．结果 -&#H@Gyw  

fP>K!@!8   加入浓度（μg·mL-1）	hB Sci|*f   提取回收率（%）	Cq7EdK;x   方法回收率（%）	G(alM=q   RSD（%）
			=Vgj=19X(   日内	$/sQatic     日间
qlT'gUt=H   100	UTa tcn   92.0±1.8	 oQrkd:   101.2±3.5	lP@/x+6tg   1.1
4XkSj9D~z   50	Ksp!xFk   93.6±5.6	GEg 8\   107.2±1.5	-U6" Ce   2.9
+4kBd<0Y   5	UB3b   89.3±1.3	C~4$A/&(   95.3±4.3	4v+4qyMyE   2.2

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色谱图见图1。保留时间：异环磷酰胺11.6min；环磷酰胺12.8min，峰形良好，无杂质峰干扰。 B!vI^W  
色谱条件 giy4<   
色谱柱：Zorbox-ODS C₁₈ (4.6mm×250mm,5μm) PvzB, 2":  
流动相：乙腈-水（25：75） qb+vptg
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流速1mL·min^-1；检测波长200nm，进样量为20μL；柱温：室温