高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺方法的改进 [复制链接]

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1．2环磷酰胺内标液：取环磷酰胺对照品0.2g于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为2mg·mL^-1的内标溶液，于冰箱4℃ 保存。 ?
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1）柱活化：依次用2mL乙腈，再用2mL生理盐水活化小柱 <^YZ#3~1T  
2）上样：把处理好的样品过柱 :}[[G2|9  
3）淋洗：待血样完全流出后，先用1mL生理盐水冲洗，再用1mL 5%乙腈进一步冲洗杂质，待淋洗液完全流出后，加压将柱抽干 }ej-Lu,b3  
4）洗脱：用0.5mL乙腈洗脱，收集洗脱液，取20μL进样测定。 !Z`xw k"!  
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4．结果 T7!=KE_z  

WA79(B   加入浓度（μg·mL-1）	n:5*Tg9   提取回收率（%）	G9uWn% 5r   方法回收率（%）	/DQcM.3   RSD（%）
			?G>#'T[   日内	,9;d"ce     日间
Y )X58_En   100	X@7K#@5   92.0±1.8	'd@Vusq}2   101.2±3.5	!%2aw0Yv   1.1
CQcb !T   50	#2!M+S   93.6±5.6	J}.y+b>8 \   107.2±1.5	r4c3t,L*$I   2.9
^JMSe-   5	ku'%+svD   89.3±1.3	DOWUnJ;5   95.3±4.3	x./jTebeO   2.2

!+M H?A  
色谱图见图1。保留时间：异环磷酰胺11.6min；环磷酰胺12.8min，峰形良好，无杂质峰干扰。 R^F99L  
色谱条件 Z<r&- !z  
色谱柱：Zorbox-ODS C₁₈ (4.6mm×250mm,5μm) CFZ=!s)B  
流动相：乙腈-水（25：75） ,oP-:q!PC  
流速1mL·min^-1；检测波长200nm，进样量为20μL；柱温：室温