水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

HRj7n<>L=  
Lr wINVa  
1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） ~Vwk:
+):  
2．样品处理 " \`BPN  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 Xm%iPrl D  
\y[Bu^tk  
含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。 Q^[e/U,  
3．净化步骤： r>E\Cco  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA<sub>2</sub>Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 O>nK,.  
bd,Uz%o_  
4．浓缩及定容： 5r^1CFO  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃
| A3U@>6  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 3fm;r5  
gW'P`Oxw  
5．HPLC条件 bK!,Pc<  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm ,2RC|h^O,  
流动相：A:B=77:23 y>>vGU;  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. \m(ymp<c`  
B：乙腈 g@<sU0B  
@YEw^J~  
6．结果：（两个平行） #.<*; rB  

wCV>F-   名称	"}0)YRz%   回收率-1	M4zX*&w.T   回收率-2
X!,#'&p&   土霉素	=''mpIg(   128%	eFt\D\XOW   137%
B*-ToXQQr   四环素	di8W2cwz   91.8%	L{cK^ ,   97.4%
ZmEG<T05   金霉素	rFKo E%   88.5%	)$ ofl%+   87.1%
{D;Xa`:O   强力霉素	XD;15a   97.3%	b}ySZlmy   95.3%