水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） y;
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2．样品处理 WJk3*$=  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 p)VMYu
 
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 /PbMt  
3．净化步骤： ;@ G^eQ  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 lbPn<  
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4．浓缩及定容： O8Z+g{  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ ^ ]Q.V  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 3!%-O:!  
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5．HPLC条件 gyegdky3  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm 1/i1o nu}  
流动相：A:B=77:23 AMASh*  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. lM#,i\8Q  
B：乙腈 ?9>wG7cps7  
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6．结果：（两个平行） w`fbUh6/  

#l@P}sHXq   名称	eI-SWwmv/u   回收率-1	;-BN~1Jg   回收率-2
u,{R,hTDS   土霉素	Z9|A"[b   128%	d p&G([   137%
%yd(=%)fMB   四环素	5g O9 <   91.8%	o^Lq8u;i*   97.4%
GB"Orm.   金霉素	wLb:FB2   88.5%	nkTdn   87.1%
fK *l?Hr   强力霉素	! m%'aQHH(   97.3%	bfm+!9=9S   95.3%