水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） {J&[JA\  
2．样品处理 #uRj 9|E7  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 %P8*Az&]T  
[I~&vLTe  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 ` x|=vu-  
3．净化步骤： /Z~}dWI  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA<sub>2</sub>Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 5%r:hO @S  
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4．浓缩及定容：
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浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ n0a|GZyO]  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 
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5．HPLC条件 V|3^H^\5P  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm @
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流动相：A:B=77:23 |tr^ `Z  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. Q\W?qB_  
B：乙腈 xYd]|y  
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6．结果：（两个平行） cM_!_8o  

A8X3|<n=   名称	`B$rr4_   回收率-1	,,c+R?D   回收率-2
}'p"q)   土霉素	s-801JpiJ   128%	Y@y"bjK \   137%
"wR1=&gk   四环素	e> 2KW5.   91.8%	XW.k%H4@   97.4%
3y%,f|ju   金霉素	dKQu   88.5%	XI+GWNAmJ   87.1%
xj[v$HP   强力霉素	5AK@e|G$w   97.3%	qi*Dd[OG   95.3%