水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

6ki2/ Q  
tLWw<)t  
1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） M/quswn1  
2．样品处理 R,G*]/r`  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 [&n[p?  
R~4X?@ZB  
含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。 &bW,N  
3．净化步骤： Bz/Vzc(  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA<sub>2</sub>Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 J+`aj8_B  
l~rj7f;  
4．浓缩及定容： X ha9x,  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ {*7MT}{(  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 iYSt l  
0N,<v7PX  
5．HPLC条件 fY!?rZ)$  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm 5l6/ 5  
流动相：A:B=77:23 /I`TN5~  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. xol%\$|  
B：乙腈 N)X Tmh2v|  
egaX[j r  
6．结果：（两个平行） nje7?Vz  

GJ,&$@8)   名称	+Q5O$8i   回收率-1	J2=4%# R!   回收率-2
<Ua~+U(FR0   土霉素	jrib"Bh3,   128%	P@7>R7 gS   137%
s@\3|e5g   四环素	jx}&%p X   91.8%	gu k,GF9p]   97.4%
hfwJZ\_60   金霉素	[3Q0KCZ0(   88.5%	6Og@tho   87.1%
^#_gk uyd!   强力霉素	g257jarkMF   97.3%	u+)!C*ho   95.3%