水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） UHk)!P>  
2．样品处理 hW~
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称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 I!(BwYd  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 " o3Hd  
3．净化步骤：  JJs*2y  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 sV0NDM0  
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4．浓缩及定容： u"wWekB  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ +T4}wm  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 wZJbI[ r  
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5．HPLC条件 19[!9ci  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm =[Z3]#h  
流动相：A:B=77:23 oSjYp(h:  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. .RAyi>\e  
B：乙腈 B&1E&Cv_8  
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6．结果：（两个平行） AGO"),  

5j0 Ib>\   名称	fU$_5v4   回收率-1	e{XzUY 6   回收率-2
7xux%:BN   土霉素	XJy.xI>;   128%	:("@U,   137%
E $W0HZ'   四环素	q"DHMZB   91.8%	=K|#5p`   97.4%
I3'UrKKO   金霉素	piuM#+Y\'S   88.5%	:2/jI:L~   87.1%
jAv3qMQA   强力霉素	7zA+UW r   97.3%	~Z*7:bPN!^   95.3%