随着现代
食品工业的发展，人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等，采用了多种现代食品加工
技术，但是不幸的是，由于种种原因，在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质，比如最近出现的食品中添加“塑化剂”
邻苯二甲酸酯类物质。
761"S@tf$} BY2txLLB 以往，由于人们对邻
苯二甲酸酯类的
安全性认识不足，多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况，开发了一系列的
检测方案，以供大家参考。
S:T>oFUot K%#C+`Ij 1.水性样品 ]cY'6'}Hz ?26[%% 此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水，茶、果汁和功能饮料等；某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液，然后全部作为待处理液，如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP （500mg/6mL）。
' F<e )D? ATkqzE`; 样品处理：取10mL样品，进行固相萃取富集处理
X-^Oz@.> JO$]t|I 固相萃取
方法：
43]&SXprH fmyS#
6" 活化：5mL甲醇、5mL水
#SUq.A Ss/="jC 上样：10mL水性样品
YLd%"H $n :Fk&2WsW: 淋洗：5mL5%甲醇水，真空抽干20min。
&BR?;LD a{6|[a R 洗脱：5mL甲醇
r+yLK(<zp RH 0a\RC!G 检测：将洗脱液用氮气吹干后，以1mL甲醇定容，然后用液相色谱法检测。
Vp94mi#L } aDEP_b; 说明：此法多适用于配套液相色谱检测，当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时，需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
? +!?$h M57( ,#g 一般来说，对于此类样品，可以采用正己烷液液萃取的办法，用GC/MS（灵敏度较高）直接检测。
8=Ht +Br q+Q)IVaU81 2.低脂液体样品 @~ HD<K <H#K `|Ag 此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理
产品为Cleanert MAS-PAE管。
(J#3+I s2kynQ#a 样品处理：向玻璃离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
$cCB%}
3E9j%sYk 检测：GC/MS检测。
5eJd$}Lbc ybkN^OEJ 3.低脂固体食品 b@C vs4 $ Q4b~ 此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等，推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
ay.IKBXc HB:i0m2fJW 样品处理：取1g已制成粉末状的样品，2mL水，加入到Cleanert MAS-PAE离心管中，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
ij^!T
Y[0 L1BpY-= 检测：GC/MS检测。
@TDcj~oR ? >Fh@:M7z 4.高脂样品 &B
C#u.^! FW,D\51pTP 此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等，推荐前处理柱为Cleanert PAE。
yuB BO:\. .
}wir, 4.1 动植物油脂样品的处理 NM ]/OKs'H d8I/7
;F X 取0.2g样品，用1mL正己烷溶解，作为待净化液。
|Sq>uC) NGu]|p 固相萃取方法：
3-5lO#&# !/SFEL@_B 活化：5mL正己烷
)g9qkQ 8q dmne+ufB 上样：全部待净化液
o\N}?Z,Kk ececN{U/ 淋洗：7mL正己烷
vbp )/I-h wpdT " 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
K""04Ew*pV 3h&s=e! 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
`/O_6PQ} o <y7Ut 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中，作为待
gd*\,P ?QgWW 检液。
Ty m!7H 2 z3,z&Ra 检测：GC/MS检测。
PuWF:'w r 9ccEF6o0= 4.2其他样品的处理 Q_Rr5/ hn-S$3')` 取样品0.5g，以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取，然后以4000rpm转速，离心5min，取上清液作为待净化液。若样品中含有水，视情况加入适量无水硫酸钠后，再进行上述操作。
JW $#~"@r d;z`xy(C 固相萃取方法：
_<8n]0lX3 \K=Jd#9c 活化：5mL正己烷
B*{CcQ<5 F[lHG,g- 上样：全部待净化液
U;_ ;_ q8U]Hyp(` 淋洗：3mL正己烷
P _9O8"W %!@Dop/< 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
5i0<BZDTef OHB!ec6W 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
'vXrA ^'} Td~( 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。
Tsa&R:SE DpA)Z ?? 检测：GC/MS检测。
V r y# A2xORG&FD 5.复杂样品 # H4dmnV UXd\Q'' 此类样品多为油水混合态，同时添加有多种风味物质，成分比较复杂，包括方便面调味包，酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量，对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱，对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
VBOq~>V6(v #CM2FN:W 5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理，以方便面调味包为例： sx6`
g; >J4_/p>Qs 取0.5g样品，加入5mL正己烷，涡旋振荡3min后，再加入500mg无水硫酸钠，涡旋振荡3min后，以4000rpm转速，离心5min，取全部上清液作为待净化液。
{1FY HM^ IKpNc+;p 固相萃取方法：
m Wtwp- \i{=%[c 活化：5mL正己烷
#bnFR mgS%YG 上样：全部待净化液
x }-r Ar m@O
gT<E]_ 淋洗：3mL正己烷
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L 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷：甲苯（50:40:10，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
QG fU: Up`zVN59. 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
&FGz53fd4 HdLVXaD/ 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。
2U i) '0 7|\[ipVX:3 检测：GC/MS检测。
C% l~qf1n -]HO8}-Rjs 5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理，以酱油为例 G .1pg]P! X#IVjc:&L 样品处理：向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲苯（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAEc填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
Z{ &PKS zkB_$=sbn# 检测：GC/MS检测。
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#r v$lP?\P;}X 附件一： |>Kf_b Y# Jt@7y"< 高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
Gb\}e}TB[ $GPenQ~}, 色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L）
'Q ?nU^:F# }>fL{};Z" 流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50
q#F ;GD U SfOc 流 速：1.0 mL/min
3@_je)s p~En ~?< 波 长：242 nm
/EA4-#uw .^fq$7Y}7 进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm）
FX4](oM {eMu"< 样 品：15种邻苯二甲酸酯
/m( vIl A tzp\oO 浓 度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A）
z{7&= $ T1LtO O 溶 剂：正己烷 /40%流动相A
2( Vm 0E W :ih#YW_F 柱 温：30℃
R4%!W~K 
Nj@k|_1 图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
1BmevE a) 25 NZIal< （邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯
DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯
DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯
DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯
DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯
DINP）
EL;Ir tU :w_Zr
5H] 结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做
实验，供大家参考。
'R C(ss1G g~S>_~WL 附件二 x~?,Wv|cm 气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
=hH>] $J[ Ola>] 0l 仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS
{+0]diD HpC|dtro 色谱条件：
No=Ig-It
A|,\}9)4X[ 色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
|<96 H8 Ia=wf"JS) 进样口：250℃，不分流进样
rUvq AfE&+ >k,bHGj? 程序升温：50℃（1min）20℃/min 220℃（1min）5℃/min 280℃（4min）
i/2OE&*O[ tV<}!~0,* 进样量：1μL
7 [rn
,8@ hPE#l?H@A 流速：1 mL/min
( \{9W S$HzuK\f 质谱条件：
Kn SXygT ^o+2:G5z} 接口温度：280℃
CkE@ Ll3Z UTGR{>=> 电离方式：EI
'Cd 8l#z7 (cAv :EKpo 电离能量：70eV
?7 e|gpQ| `<i|K*u 溶剂延迟：7min
]:(>
r&' w|pk1~c(_ 监测方式：SIM模式，监测离子见下表
<6Q]FH!6 )HNbWGu
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。
ZWZRG-:&H oPSucz&s 附件三 E$ B7E@(U
"E4;M /
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 aS
]bTYJ'
2Zf} t
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表
ya[][!.G J$' Q3k ~RlsgtX" `a$-"tW~j @'go?E)f
mB.ybrig
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 *G'R+_tdE
Lt\Wz'6Y
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
*fz]Q>2g a }n!$)W*? ,ALE fepo
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