[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： dN*<dz+4r  
Kv#daAU  
M.OWw#?p:_  
&tRnI$D   
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） xBw"RCBz^  
JAiV7v4&R  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 W' 2)$e  
t#pY2!/T3  
流  速：1.0 mL/min e@,L~\  
41uSr 1  
波  长：242 nm s+CXKb +  
8v6rS-iHP  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） ?=4t~\g?  
.A `:o  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 ^y6CV4T+  
aEM#V   
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） 9E#(iP  
w6yeX<!ll  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A *|3z($*U]  
.z4FuG,R  
柱  温：30℃ =N0cz%  
P4AdfHk  
*Xnq1_K}  
[}Iq-sz;0  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） (1HN, iJy  
|S}*
M<0  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 ]a%Kn]HI&2  
lpM{@JC  
附件二 !Yf0y;e|:  
xr2:bu  
4%7*tVG  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS =+L>^w#6=  
&Os Ritj  
色谱条件： Dw[Q,SE  
X[ (J!"+  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm ; v'Y'!-J  
/km3L7L%R  
进样口：250℃，不分流进样 f5-={lUlIS  
qQ'@yTVN  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） ]>o2P cb;  
@$R a  
进样量：1μL Qa%SvA@R  
7KIQ)E'kG|  
流速：1 mL/min ?0a 0 R  

~] 2R+  
质谱条件： 6hq)yUvo4  
'1 $({{R  
接口温度：280℃  (I.`bR  
Fm':sd)' X  
电离方式：EI 3lN+fQ>)S  
bl<7[J.  
电离能量：70eV qI^jwl|k  
Qg!*=<b  
溶剂延迟：7min !y?hn$w0  
?g4|EV-56  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 yFo5pKF.J  
BkfBFUDQ  

'=.Uz3D'0   序号 auW]rwY	=[+&({   保留时间/min  F`.7_D	SGd.z6"H   中文名称 Qu_T&	ie5ijkxZ(   英文缩写 sLp LY1X	);DIrA   SIM离子 KBe {
)\Q|}JV   1 D.R	{VG[m@   8.265 /exl9Ilt]	Aq'E:/   邻苯二甲酸二甲酯 z.HNb$;	$ow`)?sh   DMP "mDrJTWa	G%jJ>T4   163、77 Yj/nzTVJ[
EoR6Rx@Z   2 TbAdTmW	k]9>V@C   9.135 @b\_696.	-0WCwv   邻苯二甲酸二乙酯 P\6T 4s	hcc-J)=m   DEP Y6?mY!	<?7,`P:h[   149、177 zRE8299%z
i3&B%JiLX   3 wK`ieHmp	L{%a4Ip   10.888 C* 6)Ut '	aa%&&   邻苯二甲酸二异丁酯 b<V./rWIB	15T[J%7 f   DIBP 8|qB1fB	pW--^aHu   149、223 :tqm2t
(yAvDyJOn   4 B"Kce"!	Y{2d4VoW6   11.637 =<zSF\Zr_	;zE5(3x   邻苯二甲酸二丁酯 ,\9mAt1O	[H:GKhPC`   DBP 9C)3 b3	M$4=q((0   149、223 u6Qf*_-K
Q$h:[_v   5 : {WrS	d O46~   11.979 87pXv6'FQ	,WB_C\.#XN   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 M|({ 4C	c6Aut`dK   DMEP hUT^V(	k8 ;uC~L   59、149、193 }uI7\\S
,s><kHJ   6 w*u{;v#	%t~SOkx   12.72 LZc$:<J<6	"o{)X @YN]   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 G=Hf&l	W[>iJJwz   BMPP $' (QTEM	'cAc{\)   149、251 0Ws;|Y g
Ki/' Ic1   7 -.{oqs $	N~):c2Kp<9   13.044 I% 9bPQ	^KkRF" :   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 =9p w uH	3$c (M99r   DEEP X%GD0h]X#	-!J2x8Ri   45、72 l]_b;iux
ieo|%N{'   8 O GJ=VQA	u R\m`   13.41 !TP6=ks	,Z>wbMJig   邻苯二甲酸二戊酯 Mo}H_8y	_+twqi   DPP |JUe>E *	|l|_ dn   149、237 OlMBMUR:
5x8'K7/4.   9 ajn-KG!A	h|bqyu   15.552 1~%o}+#-	k$C"xg2   邻苯二甲酸二己酯 )ll?-FZ 	Zta$R,[9h   DHXP 4s9c#nVlu	[?-]PZ   104、149、76 $`|5/,M%QN
hM~eJv   10 W1vCN31	>):m-I   15.694 LI[ ?~P2\	|K%}}g[<e;   邻苯二甲酸丁基苄基酯 Y2<dM/b/	huz86CO   BBP Rho5s@N7	N/K=Ygv.   149、91 NS@{~;#R
RcQ>eZHl   11 sxo;/~.p	!#?8BwnaZ   17.153 G]4OFz+	& 1[y"S   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 y_*n9 )Ct	}qAVN   DBEP =`-|&	-ui<E?v   149、223 g5y;?fqJ
{b1UX9 y   12 CZY7S*fL	H-(q#?:   17.81 <W*xsh n	>Q=Ukn;k   邻苯二甲酸二环己酯 0z7L+2#b^	o2aM#Q   DCHP 'a#mViPTQ)	\vCGU>UY   149、167 A2NF<ZsD
UQI f}iR   13 gRAC d&)	Ly7!R$X   18.056 Hm fXe	J R$r!hX   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 +}aC-&	KzphNHd   DEHP S@xXq{j	ZCYS\E7X   149、167 3~Qd)j"<
gsPl _   14 DG[%Nhle	 f:wd&V   20.444 MT6/2d	}$kQs!#   邻苯二甲酸二正辛酯 )R?;M	l&W;b6L   DNOP S1J<9xqSQ8	#yW\5)   149、279 S~NM\[S
o''wCr%   15 wO.iKX;	gSt` %   22.98 wRtZ`o	bZ 443SG   邻苯二甲酸二壬酯 @|\R}k %(	cz/Q/%j$/   DNP {9LWUCpsf	tPfFqqT   57、149、71 qO@@8/l

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 I`NjqyTW  
N-lkYL-%\j  
附件三 ~"A+G4jl  
5\z`-)  
#%DE;  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 / m=HG^!  
2}8v(%s p  
%c4Hse#Y  
Bve.C  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 41&\mx  
4EY)!?;  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 0Vx.nUQ
  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% M3.do^ss  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% \-g)T}g,I  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% VVlr*`  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% hIT+gnhh  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% %^jMj2  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% }4,L%$@n  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% Hl,W=2N  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% +U3DG$  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% E 7{U|\  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% j:v@p
zTD  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% J\b^)  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% .6Pw|xu`Pw  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% g%=z_  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% aht[4(XH5  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% NPp;78O0[  
%xI p5h]  
[MUpxOAsd  
   ]Gsv0Xk1  
8)_XJ"9)G  
MDn ua  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 Wi)_H$KII  
Q~#Wf?  
 "y}--  
{ 'NvG  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 VAHh~Q6 ;e  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% 0Qf,@^zL*  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% rX2.i7i,  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% VY7[)  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% #Lh;CSS  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% 0AL=S$B)
 
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% 1~NT.tY  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% -&zZtDd F  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% s"r*YlSp"  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% 286jI7T  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% G[uK-U  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% n FHUy9q  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% 8e1UmM
[  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% X^wt3<Kbf  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% 0z6R'Kjy A  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% 6 ob@[ @  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 >4CbwwMA  
w\O;!1iU  
G"A#Q"  
8Zd]wYO  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 x[e<} 8'$(  
PCtzl)  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 yJIscwF  
l.M0`Cn-%  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 dSHDWu&  
c7H^$_^=  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 do'GlU oMC  
_|`S3}q|d  
5|)W.*Q  
^S; -fYW2  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 S3J^,*'  
8LCb+^  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， Zv{'MIv&v  
))Za&S*<  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 gjlx~.0d  
|Y.?_lC  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 Q/Rqa5LI:  
BnY&f  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 t_1LL >R  
o4WDh@d5S  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 #\ErY3k6&  
R.3q0yZ wF  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 P$,Ke<  
N$tGQ@  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 _yT Ed"$  

/|#fejPh  
%;"y+YFdv  
*k>n<p3dd  
S>; 5[l 4  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： ymcLFRu ,  
_t}WsEQ+P  
dcWD(-  
vgN&K@hJ  
1、样品提取方法： 7i1q wRv  
m<2M4u   
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 5.J.RE"M  
ib791  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 <yg
F(  
[;myHI`tw  
0Z]!/AsC  
-1ub^f
eJ,  
2、固相萃取方法： U_c
*6CK  
t#eTV@-
 
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： i8HTzv"J  
Tc3yS(aq  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； 2Q:+
_v  
?p8_AL'RS  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； g5r(>,vY  
!brf(-sr)  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； ?#UO./"  
G[q$QB+  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 ijx0gh`~  
fXQNHZ|4  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 ZLAy- 9^Y  
Qv /=&_6  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 fPW@{~t  
c=.(!qdH  
\d$!a5LF}  
{%6`!WW[  
补充说明： OX\F~+  
O]1(FWYy  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 5iydZ  
y;@:ulv[  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 #],& >n7'  
e(=w(;84  
(mtk 4  
QbpFE)TYJ|  
x0w4)Ic5  
G,Azm}+  
cY.bO/&l  
s>n)B^64W  

/HRFAqep  
M%;hB
*9  
um>6z_"  
9ahWIO%  
HYSIN^<oy  
?|B&M\}g  
EV@X*| w  
7X'u6$i  
'o>B'$  
h Pa_VrH  
g:Xhw$x9  
vJOw]cwq  
RxWVe-Dg  
@>>~CZ` l  
s?,Ek  
lHe{\N[C  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS 3H6lBF  
MC:@U~}6  
色谱条件： $jqq `n_  
!1{e|p 7  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm J!pygn O  
v4c[(&  
进样口：250℃，不分流进样 =Bhe'.]QSx  
W~9tKT4  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） 8sTp`}54J  
2:7zG"$  
进样量：1μL RA'M8:$  
4Vi`* !  
流速：1 mL/min 6vNrBB  
g<f <Ip=  
"(z5{z
?S  
lc,tVe_  
质谱条件： k_5L4
c:"  
<[\`qX  
接口温度：280℃ T; y>>_,  
nv%rJy*w[  
电离方式：EI Xr$J9*Jk-  
#W'H R
 
电离能量：70eV b8"?VS5-"  
,t9^j3I xg  
溶剂延迟：7min bg&zo;Ck8T  
+*T7@1  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 m)v"3ib  
3
U.88{y  
D!NQ~'.a=2  
,dov<U[ia  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

{fF3/tL  
V=qwwYz~  
-UdEeZz.  
+5o8KYV