[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： MtpU~c  
wO
^$!zB W  
-T
zI>Fz  
~/j$TT"  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） x[vpoB+c  

K-2.E  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 tt+>8rxF:;  
D ?Nd;[  
流  速：1.0 mL/min +dqk6RE  
:d;[DYFLxb  
波  长：242 nm 4^0d)+Ff  
O!:QJ ^8d  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） yOX&cZ[  
_ ,DO~L  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 dX_!0E[c  
JT4wb]kdV  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） _~tm7o +js  
0z<H(|  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A :%N*{uy  
;xfO16fNk  
柱  温：30℃ q^5yk=2fq  
N*Yy&[  
RoX &+~  
u+m4!`  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） ~F;CE"3A  
{-HDkG' 8  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 "qawq0P8Z
 
I FsE!oDs4  
附件二 \ZMP_UU (  
{SJsA)9:#  
}%$OU =T  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS T6uMFD4 |  
r2nBWA3  
色谱条件： paWxanSt  
o\4CoeG  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm 26.)Ur<F  
W pN.]x  
进样口：250℃，不分流进样 3+>OGwfQ  
 WK==j1  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） ^H3m\!h  
.'j29 6[u  
进样量：1μL g1{/ 5{XI  
O~PChUU*Y  
流速：1 mL/min -Sz_
mr  
RlRs}yF  
质谱条件： aSL6zye ,  
%> zjGF<
 
接口温度：280℃ `PlOwj@u0`  
y=Q!-~5|fF  
电离方式：EI zzIr2so  
g"K>5Cb  
电离能量：70eV cb$-6ZE/  
|"]PCb)!  
溶剂延迟：7min QlEd6^&  
8P2 J2IU  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 I#G0, &Gv  
fex,z%}p  

{whvTN1#dh   序号 T!|=El>	0-d>I@j   保留时间/min {38bv.3'	pA}S5x   中文名称 _NZ@4+aW	`[fxyg:u   英文缩写 Hi}RZMr1	H17-/|-;0!   SIM离子 aSutM 
Af(WV>'   1 +0l` 5."d	F7*wQ{~   8.265 q(M:QWA q	w n|]{Ww35   邻苯二甲酸二甲酯 {R6HG{"IS6	;3eKqr0   DMP q8P.,% 	8+L lx   163、77 b\7iY&.C|
ZJW[?V\5=   2 &DG->$&|	* jq7X    9.135 qy1F*kY	El j_,z   邻苯二甲酸二乙酯 zw<p74DH	PXoz* )tk   DEP {PU!=IkTS	6Q&r0>^{   149、177 g6t"mkMY L
:,12")N   3 asiov[o;	s'aip5P   10.888 >Hb^P)3	w.\w1:d   邻苯二甲酸二异丁酯 :AdDLpk3j	WL,&-*JAW   DIBP ,d+fDmm3	yH 9!GS#   149、223 1be %G [*
7'-L p@an   4 .roqEasu8	= (a1+.O   11.637 (BxJryXm	p(xC*KWB   邻苯二甲酸二丁酯 \~d";~Y`	IEjP<pLe   DBP ^=n+T7"J	Qu5UVjbE,   149、223 y-p70.'{U
QB:i/9   5 FJ*i\Q/D	EM7+VO(   11.979 Tmh(= TB'	gH2,\z`[4   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 BR'I +lQ	)!g{Sbl   DMEP ,f}UGd[a	`X,yM-(   59、149、193 j1SMeDDM ~
g}laG8   6 |AlR^N	mh<=[J,%p   12.72 h' !imQ	e*+FpW@   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 |uW:r17	2+Px'U\   BMPP So ie^$ Y	6#j$GH *   149、251 9Pw0m=4
#,{+3Y&5-+   7 R),zl_d_	9Lh|DK,nV/   13.044 ^-FRTC	X7L8h'(@   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 T0 )"1D<l	T5Dw0Y6u,   DEEP Og;-B0,A	50dGBF   45、72 kj+ #TnF-
y/V%&.$o=   8 s] /tYJYl	-/]W +[   13.41 q P ;A}C	~lEVXea!   邻苯二甲酸二戊酯 >pkT1Z&'	4`#F^2r!   DPP q.Nweu!jQ	gBu1QviU   149、237 Y+/JsOD
3Q/#T1@   9 P LM_#+R>	L]a`"CH:a$   15.552 f[gqT yiP	c41: !u^   邻苯二甲酸二己酯 4LI0SwD#^/	5)1+~B   DHXP u%2<\: ~j	o/[   104、149、76 @|bP+8oU
x4Rk<Th"o   10 _RMQy~&b	UVf\2\Y   15.694 (7lBID4	NTs;FX~g[   邻苯二甲酸丁基苄基酯 lD;'tqaC	'p)Q68;&   BBP uMXc0fs!$	i~=s^8n`l   149、91 >AD=31lq
E| B d>G   11 x49!{}	<2Y0{ 8)   17.153 f%^'P"R	ayp b   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 <3 @}Lj	1/j$I~B   DBEP * UcjQ 	a#(U 2OP   149、223 E1q%gi4Q%
5rN_jC*U   12 xe:' 8J6L	H:}}t]E   17.81 XCPb9<L	mY2:m(9"5   邻苯二甲酸二环己酯 8]*Q79	3z,2utH   DCHP {g=b]yg\o	# cWHDRLX   149、167 QWhp:]}
wixD\t59X   13 ,V2#iY.%}N	&t[|%c*D&   18.056 i+U51t<	]L]T>~X`   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 #_ p	.HOY q   DEHP /'`6 ; uRN	?1DUNZ6   149、167 ahoh9iJ
e@+v9Bs]q   14 `E%(pjG	-g$OOJB6   20.444 {Ot[WF	ndB@J*Im u   邻苯二甲酸二正辛酯 _we3jzMW	`^`9{@~   DNOP z.{HD9TD	k~ZBJ+ 94   149、279 &7lk2Q\
pO5v*oONz+   15 J1& A,G b	!+%Az*ik   22.98 -.^=Z!=M	,WzG.3^m   邻苯二甲酸二壬酯 Cd$dnHVh	oPp!*$V   DNP VM=hQYe	EaJDz`T}   57、149、71 $@5%5

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 qI%9MI;BV  
>,Swk3  
附件三 1MzB?[gx  
b8-^wJH!  
;>hPHx  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 PT*@#:MA  
Erymx$@P  
"lj:bxM2C  
n#AH@`&i  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 $ G([#N<  
nLLHggNAV  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 sU3V )7"  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% ^Q+5M"/8  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% 
46JP1  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% UVRV7^eTe  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% d~s-;T  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% t#Yh!L6>  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% xo3)dsX  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% Xst}tz62F  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% j>=".^J  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% 4y)1*VU:  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% vx,6::%]  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% BbhdGFG1  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% 0a;zT O/"v  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% 3Q6
#m3AWY  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% ^E8Hv  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% Lg53 Ms%  
sVf7g?  
;<Q_4 V
 
   9]9(o  
3`I_  
^u<+tV   
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 ;W"[,#2TM  
c}cboe2  
`_ L|Is=n  
zAIC5fvu  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 -"H9W:  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% woKdI)f$  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% r~t7Z+PXF  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70%  q\"$~*  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% ,%^0 4sl  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% SfR_#"Uu  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% |@F<ajlV  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% a{=~#u8  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% ,`b9c=6;  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% %qhaVM$]  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% ' u~use"  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% Yy]Henw;  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% Hl51
R"8o  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% ~}fpe>M:  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% Rh|&{Tf  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% (msJ:SG  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 ;"2(e7ir  
Y;=GM:*H  
N)EJP~0  
wV q4DE  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 Va$JfWef  
4oPr|OKj{*  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 &4m;9<8\  
B/K
{sI  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 7#sb},J{  
:?$<:  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 tC&jzN"  
qb PC5v  
p><DA fB  
#1[Q?e4,0  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 yHxi^D]  
+\66; 7]s  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， 8Og)(BC  
;Rd\yAG  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 &$.x1$%  
)}SiM {g  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 6N'HXL UlQ  
3bMUsyJ2  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 )4bZ;'B5  
Ujss?::`G  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 eE[/#5tK  
!FR1yO'd>  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 .X(ocs$ }  
fY9/u=  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 X5eT
j  

lfG's'U-z  
?b$zuJ]  
*\vc_NP]  
mR@X
t#  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： [63;8l
}  
PFw"ICs  
[SvwJIJJ  
_x{x#d;L3  
1、样品提取方法： DNe^_v)]|  
"c*|vE  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 zghm2{:`?g  
Q1[s{,  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 'b,D;'v  
Fgk/Ph3r  
t_Wn<)XA  
cf' Z#NfQ  
2、固相萃取方法： .zt]R@@6  
')V5hKb^  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： 78-:hk  
R[;Z<K\Nn?  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； ;|y,bo@sJJ  
r%9Sx:F  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； ~^*tIIOX  
FzIA>njt  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； M{QNpoM  
s@|?N+z  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 0^4*[?l9q  
 lzuZv$K  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 |D~MS`~qd5  
wF(FV4#gs  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 2,\u Y}4  
?cvv!2B]T  
f2=s{0SX0  
vIJdl2(^E  
补充说明： [F%\1xh  
/iK )tl|X  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 k|V{jBG"@  
'e)t+  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 -=RXhE_{  
r0sd_@Oj  
D7%89qt  
J L3A/^  
A9#2.5  
C{))T5G  
0kkiS3T  
1/n3qJyx2}  
S8y4 p0mV  
roKiSE`  
yE7pCgXt  
qg O)@B+  
(|x->a  
N 8OPeY  
BYY>;>V  
2
/~v  
2PC4EjkC  
lG{J  
T/3UF  
XBc+_=)$  

M *}$$Fe|  
9\xw}ph  
$^l=#tV  
0'~?u'  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS H5 -I}z  
Z
LV~It&)  
色谱条件： 9qPP{K,Pq2  
/x-t-}  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm QSLDA`  
&#;, P:.'  
进样口：250℃，不分流进样 rB)WHx<  
-(2-zznZ  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） f8j^a?d|
  
WX[ycm8  
进样量：1μL ~)Z`Q  
w.3R1}R  
流速：1 mL/min w" e2}iE7  
#-W5$1  
)ad-s  
X*~YCF[_  
质谱条件： ]]7T5'.  
1-n
0"lP~4  
接口温度：280℃ BpCSf.zZ  
B/71$i
 
电离方式：EI *" )[Srbg  
#&Ee5xM=  
电离能量：70eV w&{J9'~  
8M|Q^VeT,1  
溶剂延迟：7min 9V&LJhDQ  
RBXoU'.  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 `FwAlYJK  
_X[c19q  

=FnZkJ  
5*AKl< Jl  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

oB9m\o7$  
bRp[N  
5b,98Q  
V*}zwms6