三聚氰胺分析方法包组件清单 [复制链接]

-K(d]-yv  
%#~wFW|]x  
包括：
O"EL3$9V  
1. Venusil ASB-C18或ASB-C8色谱柱或XBP-C8色谱柱（4.6*250mm,5μm,150Å）任选1支   GYiL}itD=3  
2. 混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支/盒，3盒 5 
}Ge  
以上2项均为科技部“十一五”国家支撑计划成果 wbcip8<t  
3. 三聚氰胺标准品1瓶（250mg，≥99.5%） $ta JVVF  
4. 真空固相萃取装置（12位） m9MYd  
5. 0.22μm，13mm Nylon针式过滤器过滤 200个/包 =54D#,[B  
6. 三聚氰胺分析方法手册1份 }~PG]A  
7. 庚烷磺酸钠（10g/瓶），高纯甲醇、乙睛 nvLdgu4P>  
~vA8I#.  
* 试剂规格请以签订合同时为准，博纳艾杰尔科技拥有最终解释权。 +zk5du^gZ  
1 固相萃取(SPE)柱的选择： /ar0K9`c  
三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点： u$zRm(!RB  
1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。 dZf1iFCP  
2) 批次重复性好。 8au Gz ,"  
3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。 WjR2
:kT  
2 样品前处理步骤： C@]D*k  
2.1标准样品配制： LH+Bu%s  
取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以合适溶液稀释至所要的浓度。 |@1(^GX  
2.2提取： yX{7<\x   
称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10mL)，加入50mL 1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)，同时处理多个样品，需要用真空固相萃取装置（12位），可达到方便、快速、高通量分析样品的目的。 :%Iv<d<  
2.3净化(PCX小柱，60mg/3mL) ： U=j`RQ 9,  
1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水 %x@bP6d[  
2) 上样：加入提取液3mL +/[Rvh5WZ  
3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。 H
Gh)d` 8  
4) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。 "%dENK  
5) 浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至1mL。 O0BDUpH  
g[@0H=  
e?07o!7[;  
2.4检测：HPLC-UV检测方法 iK1{SgXrFI  
$I#~<bW,  
三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局（FDA）的三聚氰胺检测方法和中国农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列和Venusil XBP色谱柱，均能得到良好的结果，分析色谱图如下：1、 三聚氰胺的FDA检测方法 2Q%M2Ua  
色谱柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm ;H71A[M T  
缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0。 (k"0/*F4_  
流动相：缓冲液：乙腈= 85：15 V8o, e  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10μL， g2LvojR  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤 TI"Ki$jC  
流 速：1.0mL / min TBF{@{.d  
柱 温：40 ℃ R&P^rrC@B5  
波 长：240nm ga;t`5+d  
2、三聚氰胺的中国农业部颁标准检测方法 vt(n: Xk  
（1）色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm -,mV~y  
缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM庚烷磺酸钠 E J6|y'  
流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15 v Oo^H  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL !|ic{1!_  
进样前用 0.22μm针式过滤器过滤 ?$/W3Xn0%  
流 速：1.0mL/min jcxeXp|00  
柱 温：40℃ y,<\d/YY@  
S^i<_?nwg  
波 长：240nm @_;vE(!5  
（2）色谱柱：Venusil XBP-C8 4.6×250mm缓冲液：10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠 _]+ \ B  
流动相：缓冲液：乙腈=85：15进样量：样品用缓冲溶液溶解成约0.1mg/ml，进10μL I [LHJ4  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤流速：1.0mL/min DwXSlsN3v  
柱温：20℃波长：240nm [;7$ 'lr%D  
Rt＜10minLC-MS参考方法 EI&)+cC  
由于HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，限制了液质联用方法的使用；但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，没有良好的保留与分离。源于此问题，博纳艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用博纳艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离，参考方法如下： nqib`U@"  
缓冲液：10mM NH4AC流动相：缓冲液：ACN=95：5 82=>I*0Q  
流 速：1.0mL/min进样量：先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10μL a0B,[i  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤柱温：40℃ qMcOSZ%8J  
波长：240nm ?Ns aZ