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HPLC法测定十八种天然氨基酸和三种非天然氨基酸 [复制链接]

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离线jlhaina
 

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2023-07-15
关键词: 氨基酸
:>$)Snqo=n  
十八种天然氨基酸和三种非天然氨基酸:
十八种天然氨基酸:Asp,Glu,Ser,Gly,His,Arg,Thr,Ala,Pro,Tyr,Val,Met,Cys-Cys, Ile,Leu,Nle,Phe,Trp,Lys.
"3{xa;c  
22\Buk}?  
三种非天然氨基酸:Pal,Nal,Cpa XnQd(B`M  
氨基酸标准溶液和样品溶液的衍生(PITC柱前衍生氨基酸分析方法 X-! yi  
氨基酸标准溶液含有17种天然氨基酸。 v#.FK:u}  
样品溶液含有十七种天然氨基酸和三种非天然氨基酸。 YH^_d3A;  
准确量取样品溶液200μl,置1.5ml塑料离心管中,准确加入20μl正亮氨酸内标溶液,混匀,用氮吹仪上吹干后,加220μl 0.1mol/L盐酸溶解,加入三乙胺乙腈溶液100µl,异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl,混匀,室温放置1小时,然后加入正己烷400µl,振摇后放置10分钟,取下层溶液,用0.45µm小滤器过滤。 * eL %[B  
另准确量取混合氨基酸标准溶液200µl,置一1.5ml塑料离心管中,准确加入20μl正亮氨酸内标溶液,混匀,加入三乙胺乙腈溶液100µl,异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl,混匀,室温放置1小时,然后加入正己烷400µl,振摇后放置10分钟,取下层溶液,用0.45µm小滤器过滤。 {a9Z<P  
色谱条件: #6_?7 (X  
色谱柱:Agela Venusil AA柱,100Å,4.6×250mm,5µm(订货号:AA952505-0) 2GcQh]ohc  
流动相A:称取15.2g无水醋酸钠,加水1850mL,溶解后用冰醋酸调pH至6.5,然后加乙腈140mL,混匀,用0.45µm滤膜过滤。 .G1NY1\  
流动相B:80%(V/V)乙腈溶液。 F8Y D:   
洗脱梯度:
JiP]F J;  
ppVjFCv0<  
图1 氨基酸标准溶液(十七种天然氨基酸+正亮氨酸) wCeSs=[  
图2 氨基酸标准溶液(十七种然氨基酸+正亮氨酸+三种非天然氨基酸)
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