(9;qV:0` 十八种天然氨基酸和三种非天然氨基酸:
十八种天然氨基酸:Asp,Glu,Ser,Gly,His,Arg,Thr,Ala,Pro,Tyr,Val,Met,Cys-Cys, Ile,Leu,Nle,Phe,Trp,Lys.
|!0R"lv'u m,zZe}oJ 三种非天然氨基酸:Pal,Nal,Cpa
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"+J 氨基酸标准溶液和样品溶液的衍生(PITC柱前衍生氨基酸
分析方法)
T>"GH M 氨基酸标准溶液含有17种天然氨基酸。
ELF,T( 样品溶液含有十七种天然氨基酸和三种非天然氨基酸。
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mcL 准确量取样品溶液200μl,置1.5ml塑料离心管中,准确加入20μl正亮氨酸内标溶液,混匀,用氮吹仪上吹干后,加220μl 0.1mol/L盐酸溶解,加入三乙胺乙腈溶液100µl,异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl,混匀,室温放置1小时,然后加入正己烷400µl,振摇后放置10分钟,取下层溶液,用0.45µm小滤器过滤。
"}uPz4 另准确量取混合氨基酸标准溶液200µl,置一1.5ml塑料离心管中,准确加入20μl正亮氨酸内标溶液,混匀,加入三乙胺乙腈溶液100µl,异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl,混匀,室温放置1小时,然后加入正己烷400µl,振摇后放置10分钟,取下层溶液,用0.45µm小滤器过滤。
x6,kG 色谱条件: R5QSf+/T4 色谱柱:Agela Venusil AA柱,100Å,4.6×250mm,5µm(订货号:AA952505-0)
a8?Zb^ 流动相A:称取15.2g无水醋酸钠,加水1850mL,溶解后用冰醋酸调pH至6.5,然后加乙腈140mL,混匀,用0.45µm滤膜过滤。
h[()!\vBy 流动相B:80%(V/V)乙腈溶液。
&i`\`6 q 洗脱梯度:
_7SOl.5ZE r4}:t$ 图1 氨基酸标准溶液(十七种天然氨基酸+正亮氨酸)
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图2 氨基酸标准溶液(十七种然氨基酸+正亮氨酸+三种非天然氨基酸)