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HPLC定量分析血浆的方法 [复制链接]

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只看楼主倒序阅读使用道具楼主发表于: 2023-07-13

关键词： HPCE HPLC 血浆分析

本文选择乙腈(1∶1.5)沉淀血浆蛋白，以头孢拉定为内标，首次建立了适合人血浆中头孢克罗分离分析的HPCE方法，并与HPLC法进行比较，以探讨HPCE在头孢克罗血药浓度检测方面的应用价值。实验结果令人满意，本法已成功地应用于6名健康志愿者单剂量口服头孢克罗普通胶囊后血药浓度的动态分析。

HPLC头孢克罗血浆样品预处理方式常用三氯醋酸沉淀蛋白。对于HPCE生物样品预处理，相对高浓度的待测组分可选择直接沉淀蛋白方法。本实验尝试10%三氯醋酸和乙腈来处理头孢克罗血浆样品。10%三氯醋酸沉淀血浆蛋白后取其上清液进行HPCE分离，头孢克罗和头孢拉定电泳峰展宽严重，不利于血浆样品中头孢克罗的微量检测，甚至影响HPCE定性定量分析的重现性。如果以乙腈沉淀血浆蛋白，则头孢克罗和头孢拉定的电泳峰形对称，而且高浓度的乙腈还以产生场放大效应，增进分离效能，提高HPCE检测的灵敏度。

HPLC定量分析血浆中头孢克罗浓度采用10%三氯醋酸沉淀蛋白，三氯醋酸极强的酸性不可避免地影响头孢克罗的稳定性。HPCE方法选择乙腈直接沉淀蛋白，有机溶剂的低电导和弱极性特点一定程度上会减慢头孢克罗的降解速率，而且样品室的低温控制和辅加冰块降温(可达4℃)，可使头孢克罗在电泳操作过程中保持一定的稳定性。同时，本文建立以头孢拉定为内标的头孢克罗血浆样品HPCE分离分析方法，与外标法测定的HPLC相比具有定量准确、重现性好的优点。

文章出自: 世科网