【注意】
A-Ba%Fv 放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
/A9RmTb 药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。
VR(R. 4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液
LS~at.3zX 【配制方法】
o[>d"Kp 在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃
2U)n^ 5.10mol/L乙酸酰溶液
@R&d<^I&M 【配制方法】
xF8r+{_J) 把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。
{SV/AN 6.10%过硫酸铵溶液
KlT:&1SB9 【配制方法】
i.mv`u Dm 把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。
JLu$1A@ ' 7.BCIP溶液
^MpMqm1?8; 【配制方法】
*D|a`R!Y 把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃
6*Z7JiQ0 8.2×BES缓冲盐溶液
Kn^+kHh: 【配制方法】
"W(D0oy 用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na
2HPO
4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。
Kg6J:HD49 9.1mol/L CaCl
2溶液
'APx 【配制方法】
cM%?Ot,mK" 在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl
2·6H
2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。
sTd@/>S?p 【注意】
=K:
[26 制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。
2WS*c7Ct 10.2.5mol/L CaCl
2溶液
fd4gB6> 【配制方法】
gs1yWnSv5 在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl
2·6H
2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。
H@-q NjM 11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液
#;8)UNc)} 【配制方法】
"&H'?N%9Up 用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
oOprzxf"+Z 【注意】
B=*0 DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
k(G6` dY 12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液
dm/3{\ 4 【配制方法】
dlvU=^G#G 把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。
Z5'^Hj1, 4w|t|? 比色杯光径为1cm时,吸光度=εM