上世纪八十年代诞生的PCR已经成为了生物学领域的经典老技术,它衍生出来的实时定量PCR和数字PCR也都不再是新兴事物了。那么,这么成熟的技术在未来一年中会有什么样的新发展呢?
1. 超快PCR。尽管PCR基本反应已经非常成熟了,但它的性能依然有很大的改进空间。扩增反应的速度就是其中最重要的参数之一。更快的PCR反应总是受人欢迎的,这种改进对分子诊断的意义最大,可以帮助人们在流行性疾病大规模爆发之际及时鉴定病因。今年七月Carl WITtwer等人开发了一个能准确检测DNA聚合酶速度的新方法。在此基础上,人们将有望进一步提升热稳定DNA聚合酶的催化速度。(延伸阅读:PCR技术三十周年纪)
2.数字PCR广泛应用。数字PCR是PCR领域最激动人心的创新之一,这一技术的诞生让绝对定量的梦想成为现实。随着这一技术的进一步商业化,2015年数字PCR将会取得更加显著的成绩。实验方法和数据分析上的改良,将进一步提升该技术非凡的敏感性和特异性。数字PCR的应用范围也将进一步拓展,比如单细胞分析、罕见肿瘤等位基因检测、产前诊断以及血液中游离肿瘤DNA的研究。
3.DIY 实时定量PCR。尽管实时定量PCR仪的价格已经在逐年下降,但它们依然是许多小型实验室难以承担的。另外各种PCR技术也一直是许多DIY爱好者的心头好。明年,一款平价实时PCR仪(Open qPCR)将首次交付使用,这无疑让实时定量PCR技术更加平易近人。不出意外的话,这一技术将大大推动资金匮乏区域的DNA诊断,帮助人们在这些地区检测埃博拉、HIV、食源性污染甚至假冒伪劣产品。
我们相信,2015年PCR技术的发展趋势仍将以优化反应和拓展应用为主,当然出现PCR新变种的可能性是始终存在的。反应速度、延伸范围和检测成本的不断优化,将帮助PCR继续稳坐现代分子生物学的头把交椅。