Cleanert HXN, P/N: HX1003
1．实验材料
1.1 SPE柱：Cleanert HXN（100mg/3mL）
1.2 十种磺酰脲除草剂：烟嘧磺隆、噻磺隆、甲磺隆、嘧磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、苯磺隆、苄嘧磺隆、吡嘧磺隆、氯嘧磺隆
1.3 标准溶液：磺酰脲类除草剂用乙腈配制成标准储备液，根据检测需要用乙腈将标准储备液稀释成相应的标准工作溶液。
2．实验过程
2.1 提取 称取风干后过20目筛的土壤10.00g于50mL具塞离心管中，加入提取液(pH7.8，0.2M磷酸缓冲液：甲醇（8：2，V/V）)10mL，涡旋3min，超声波振荡5min，离心10min（4000r/min），重复提取3次，合并上清液。85%磷酸调节pH值至2.5，待净化浓缩。
2.2 净化与浓缩Cleanert C18柱（100mg/3mL）进行净化：SPE柱先用5mL甲醇浸泡活化30min，淋洗，再用5mL提取液，85%磷酸调节pH值至2.5后预淋洗，上样，流速控制在1mL/min，样品过完后，抽真空10min，最后用3mL乙睛：pH7.8 磷酸缓冲液(9：1,V/V）洗脱，收集洗脱液N2吹定容至1mL。
2.3 HPLC - UV的分离条件
色谱柱：Venusil ASB C18色谱柱（ 250mm×4.6mm，5µm）；
流动相：乙腈-甲醇-水（0.2%冰醋酸），流速1mL/min；梯度洗脱程序列于表1.
检测波长254nm；柱温：30℃；进样量：10uL；
表1.梯度洗脱程序
|
时间(min)
|
0.2%乙腈水（%）
|
乙腈（%）
|
甲醇（%）
|
|
0.00
|
80
|
10
|
10
|
|
14.00
|
10
|
45
|
45
|
|
16.00
|
4
|
48
|
48
|
|
18.00
|
80
|
10
|
10
|
三、实验结果
图1，图2分别为10种磺酰脲类除草剂混合标准溶液的HPLC－MS总离子流图和选择离子流图；土壤中十种磺酰脲除草剂在三个水平下（0.01,0.1,1ug/mL）的添加回收率见表1.
图1. 十种磺酰脲除草剂的总离子流图
1.烟嘧磺隆；2.噻磺隆；3.甲磺隆；4.嘧磺隆；5.氯磺隆；6.胺苯磺隆；7.苯磺隆；
8.苄嘧磺隆；9.吡嘧磺隆；10.氯嘧磺隆
表1.十种磺酰脲除草剂在土壤中的添加回收率（三个添加水平）
|
样品名称
|
添加浓度（ug/mL）
|
添加回收率（%）
|
R.S.D（%）
|
|
烟嘧磺隆
|
0.01
|
94.52
|
7.22
|
|
0.1
|
97.31
|
4.07
|
|
|
1
|
84.83
|
0.02
|
|
|
噻磺隆
|
0.01
|
88.20
|
0.11
|
|
0.1
|
87.43
|
9.95
|
|
|
1
|
82.69
|
0.02
|
|
|
甲磺隆
|
0.01
|
104.52
|
2.81
|
|
0.1
|
87.57
|
0.25
|
|
|
1
|
83.14
|
0.05
|
|
|
嘧磺隆
|
0.01
|
95.52
|
8.43
|
|
0.1
|
94.128
|
4.49
|
|
|
1
|
80.16
|
0.14
|
|
|
氯磺隆
|
0.01
|
91.41
|
5.37
|
|
0.1
|
85.53
|
1.65
|
|
|
1
|
89.26
|
0.03
|
|
|
胺苯磺隆
|
0.01
|
102.67
|
12.85
|
|
0.1
|
92.58
|
14.90
|
|
|
1
|
87.72
|
0.01
|
|
|
苯磺隆
|
0.01
|
34.79
|
2.20
|
|
0.1
|
16.57
|
12.10
|
|
|
1
|
11.00
|
0.03
|
|
|
苄嘧磺隆
|
0.01
|
90.09
|
8.58
|
|
0.1
|
83.34
|
2.15
|
|
|
1
|
84.01
|
0.03
|
|
|
吡嘧磺隆
|
0.01
|
101.28
|
12.24
|
|
0.1
|
85.98
|
1.65
|
|
|
1
|
86.04
|
0.03
|
|
|
氯嘧磺隆
|
0.01
|
86.70
|
7.71
|
|
0.1
|
85.54
|
8.10
|
|
|
1
|
100.53
|
0.03
|
图2. 土壤中十种磺酰脲除草剂的选择离子流图