1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL）
2．样品处理
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA2Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。
含有EDTA2Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA2Na，溶解后作为样品提取液。
3．净化步骤：
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA2Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。
4．浓缩及定容：
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析
5．HPLC条件
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm
流动相：A:B=77:23
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA2Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL.
B：乙腈
6．结果：（两个平行）
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名称
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回收率-1
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回收率-2
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土霉素
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128%
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137%
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四环素
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91.8%
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97.4%
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金霉素
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88.5%
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87.1%
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强力霉素
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97.3%
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95.3%
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