1. 材料
1．1 SPE柱：Cleanert PAX,60mg/3mL,P/N:AX0603
2．样品前处理
准确量取试样2 mL于50 mL离心管内，用5mol/L盐酸溶液调节pH至3.5±0.5，加入5%乙酸铅溶液1 mL，再加入水饱和乙酸乙酯5 mL，涡旋混匀，并于摇床上振摇10 min，5000 rpm离心5 min，取出上层有机相至另一50 mL离心管内。再在下层水相中加入水饱和乙酸乙酯5 mL，涡旋混匀，并于摇床上振摇10 min，5000 rpm离心5 min，合并两次有机相，50 ℃下氮气吹干。残余物用乙腈－2%氨水溶液（10:90，V/V）3 mL溶解，备用。
3．净化
Cleanert PAX小柱依次用甲醇、2%氨水溶液各3 mL活化，取备用液全部过柱，再依次用2%氨水溶液、甲醇、5%甲酸水溶液各3 mL淋洗，抽干，用5%甲酸甲醇溶液3 mL洗脱；洗脱液在50 ℃下氮气完全吹干。残余物用乙腈－0.3%氨水溶液（10:90，V/V）1.00 mL溶解，涡旋混匀，过0.22 µm滤膜后供液相色谱－串联质谱仪测定。
4. 结果
表1 牛尿中8种利尿剂添加回收率实验结果（n=5）
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添加浓度（µg/L）
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测定参数
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药物名称
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|||||||
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氯噻嗪
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氢氯噻嗪
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氢氟噻嗪
|
氯噻酮
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三氯噻嗪
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甲氯噻嗪
|
呋噻米
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依他尼酸
|
||
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20
|
平均回收率(%)
|
88.9
|
80.0
|
91.2
|
71.1
|
86.6
|
89.9
|
95.3
|
99.8
|
|
批内RSD(%)
|
6.7
|
7.9
|
5.3
|
6.9
|
10.1
|
7.6
|
8.8
|
7.1
|
|
|
批间RSD(%)
|
9.3
|
10.3
|
13.5
|
7.7
|
15.6
|
9.9
|
12.7
|
13.3
|
|
|
50
|
平均回收率(%)
|
87.2
|
86.7
|
86.0
|
78.6
|
93.3
|
91.5
|
97.7
|
90.8
|
|
批内RSD(%)
|
9.5
|
6.7
|
9.8
|
4.6
|
7.2
|
6.5
|
10.0
|
8.3
|
|
|
批间RSD(%)
|
11.3
|
8.5
|
13.8
|
7.7
|
9.8
|
7.4
|
13.9
|
9.8
|
|
|
100
|
平均回收率(%)
|
86.3
|
93.6
|
95.6
|
81.2
|
101.1
|
82.6
|
106.5
|
109.0
|
|
批内RSD(%)
|
6.6
|
7.9
|
4.7
|
8.6
|
5.2
|
3.9
|
5.8
|
9.3
|
|
|
批间RSD(%)
|
8.9
|
10.7
|
6.4
|
11.8
|
9.6
|
7.7
|
13.0
|
12.8
|
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