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蔬菜中灭蝇胺残留量的测定-高效液相色谱法
发布时间:2013-02-28        浏览次数:217        返回列表
1SPE:Cleanert SCX(500mg/6ml)
 
2.试样制备

将蔬菜样本取可食部分,用干净纱布轻轻擦去样本表面的附着物,将其切碎,充分混匀,用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯瓶中于-16 ℃~ -20 ℃条件下保存。称取样本时,常温样本应搅拌均匀;冷冻样本应先解冻再混匀。

3.样品提取

称取匀浆样本20 g(精确至0.01 g)于150 mL烧杯中,加入50 mL 0.05mol/L乙酸铵—乙腈溶液(1+4),在14 000 r/min条件均质2 min,滤液经铺有滤纸的布式漏斗抽滤至100 mL具塞比色管中,再用35 mL 0.05mol/L乙酸铵—乙腈溶液(1+4)涮洗烧杯和均质器刀头,在14 000 r/min条件均质30 s,滤液合并于100 mL具塞比色管中,并用0.05mol/L乙酸铵—乙腈溶液(1+4)定容。盖上塞子,将滤液混合均匀。用移液管准确吸取10 mL提取液至150 mL圆底烧瓶中,在旋转蒸发仪上(水浴温度40 ℃)浓缩至只含水的溶液,加入少量0.1mol/L盐酸溶液,调节pH = 2,待净化。

4.净化

分别用甲醇和水各5 mL预淋活化SCX柱,当溶剂液面到达柱吸附层表面时,立即将3步骤中处理好的样品提取液转移至SCX柱中,弃去流出液,再用3mL 0.1 mol/L盐酸溶液清洗圆底烧瓶,转移至SCX柱中,并重复一次。然后分别用水和甲醇各5 mL淋洗SCX柱,弃去淋出液并将小柱抽干。最后依照少量多次的原则,用5 mL 5%的氨水—甲醇溶液(V/V)洗脱SCX柱,收集洗脱液于150 mL圆底烧瓶中,并重复两次。在旋转蒸发仪上(水浴温度40 ℃)浓缩至近干,氮气吹干后用2mL乙腈—水溶液(93:7)溶解蒸残物,过0.45 µm微孔滤膜,待测。

5.色谱条件
色谱柱:Venusil NH2柱,250 mm×4.6 mm,5µm    流速:1.0 mL/min 柱温:35℃
流动相:乙腈:水溶液= 97:3    进样体积:10μL      检测波长:215 nm