一、色谱条件:
色谱柱:Venusil XBP-C18
流动相:三乙胺缓冲液(取三乙胺6mL,加水2000mL,用磷酸调pH至3.2)-乙腈-四氢呋喃(96:3:1)为流动相A;以三乙胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃(70:29:1)为流动相B流速:1.2mL/min
检测波长:280nm
流速:1.0mL/min
进样量:20μl
梯度洗脱表:
时间(分钟)
|
流动相A(%)
|
流动相B(%)
|
0
|
100
|
0
|
23
|
100
|
0
|
38
|
0
|
100
|
40
|
0
|
100
|
41
|
100
|
0
|
50
|
100
|
0
|
系统适用性实验要求:调整流动相A中乙腈的量,使去甲万古霉素主峰的保留时间控制在18~22分钟。理论板数按去甲万古霉素峰计算应不低于1500,去甲万古霉素峰与相邻峰之间的分离度应大于1.5,其他各杂质峰(包括小杂质峰)之间的分离度应大于1.5。
供试品溶液制备:取本品,精密称定,加水溶解并稀释制成每1 mL中约含2 mg的溶液;
二、结果:
下表列出所有色谱峰的参数:
色谱峰编号
|
保留时间
|
色谱峰名称
|
峰面积
|
面积归一化含量
|
理论板数
|
分离度
|
拖尾因子
|
1
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15.708
|
未知杂质
|
45.64
|
9068
|
0.96
|
||
2
|
20.084
|
Demethylvancomycin
|
2569.11
|
8605
|
29.69
|
1.17
|
|
3
|
21.590
|
未知杂质
|
69.93
|
11415
|
5.73
|
1.07
|
|
4
|
29.630
|
未知杂质
|
38.92
|
529380
|
1.80
|
1.11
|
|
5
|
30.819
|
未知杂质
|
128.99
|
483261
|
16.53
|
1.03
|
|
6
|
36.881
|
未知杂质
|
8.40
|
1009708
|
1.51
|
0.95
|