（Cleanert PSA, C18, Alµmina-N, P/N: PA0010,180010,AL0010-N）
1．材料
PSA吸附剂：Cleanert PSA
C18吸附剂：Cleanert C18
中性氧化铝吸附剂：层析用（用前于600℃马弗炉烘烤）
2．样品处理
试样粉碎并混合均匀，准确称取5g（精确至0.01 g），置于50mL离心管中，加入14mL乙腈+氯仿（10+1）溶液，1.0mL10%硫酸钠溶液，均质提取。以5000转/分钟离心5分钟。准确吸取10mL提取液氮吹或浓缩至近干，用乙腈+氯仿（10+1）溶液定容至2 mL，根据样品基质情况，分别选择并称入适量C18、PSA、氧化铝吸附剂，涡混2分钟进行分散型固相萃取净化，5000转/分钟离心3分钟。准确移取1.0mL上清液于另一15mL离心管中，N2吹干，用1.0mL乙腈+水（12+88）溶液涡混溶解残渣，过0.45μm滤膜，进样。
3．色谱条件
色谱柱：Venusil ASB C18 (5μm,3.9*150mm)
流动相：A：乙腈； B：冰乙酸+水（3+1000）
采用梯度洗脱，如表1
流速：1.0 mL/min；进样量：20μL；
柱温：40℃；检测波长：270 nm。
表1 梯度洗脱程序
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时间/min A % B % 梯度曲线
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0.00 12 88 线性
8.50 12 88 线性
8.51 35 65 线性
15.00 35 65 线性
15.01 60 40 线性
20.00 60 40 线性
20.01 12 88 线性
25.00 12 88 线性
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4．结果
4.1 线行范围和方法检测限
由于不同样品即使在相同的添加水平下，回收率也不可能完全相同，所以方法检测限会略有差别，但7种化合物检测限至少能分别达到：克球酚：0.05mg/kg、磺胺类：0.05 mg/kg、地克珠利：0.10mg/kg。
4.2 回收率和方法精密度
用空白样品加标方法进行回收率和精密度实验。分别对空白鸡肉和空白鸡肝进行三个不同水平的加标，每个水平平行测定6次，计算回收率和相对标准偏差。当添加水平在 0.10mg/kg～1.0mg/kg范围内，回收率均可在65%～100%之间，相对标准偏差 1%～10%之间。鸡肉和鸡肝的加标回收谱图分别见图1和图2。
5．讨论
原QuEChERS方法应用于农残检测，称取15g果蔬样品，振荡提取，取提取液直接进行下一步净化；改进后的方法应用于兽残检测时，称取5g动物组织样品，采用均质提取，提取效率更高，然后从提取液中取10mL，旋蒸至近干，用提取溶剂溶解残渣定容至2mL，再进行下一步净化，比直接取提取液净化富集了更多的目标物，使方法检测限理论上可以提高5倍。
原QuEChERS方法用PSA去除果蔬中的脂肪酸、色素，而动物组织中含有大量蛋白和脂肪，所以净化过程中同时考虑C18和中性氧化铝吸附剂，采用混合型分散固相萃取净化，各种吸附剂的用量针对不同的样品基质进行调整，一般在100～250mg之间。在回收率方面，C18和中性氧化铝对地克珠利吸附性较强，使其回收率降低；而对其它6种兽药化合物基本没有吸附。PSA对7种化合物均有不同程度吸附。实际检测中，可根据基质情况和目标化合物性质选择合适的吸附剂及其用量。
图1鸡肉添加回收谱图
图2 鸡肝添加回收谱图