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水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法
发布时间:2013-02-28        浏览次数:512        返回列表
Cleanert Alumina-N,Cleanert PCX,P/N:AL0006-N,CX0603
 
1.SPE柱:
中性氧化铝柱:Cleanert Alumina-N,1g/6mL,使用前用5mL乙腈活化

阳离子交换柱:Cleanert PCX,60mg/3mL,使用前依次用3mL乙腈、3mL甲酸溶液活化。

2 样品制备
2.1 鲜活水产品
a) 提取
称取5.00g已捣碎样品于50mL离心管中,加入200μL混合内标标准溶液,加入11mL乙腈,超声波振荡提取2min,8000r/min 匀浆提取30s,4000 r/min离心5min,上清液转移至25mL比色管中;另取一50 mL离心管加入11mL乙腈,洗涤匀浆刀头10s,洗涤液移入前一离心管中,用玻棒捣碎离心管中的沉淀,漩涡混匀器上振荡30s,超声波振荡5min,4 000r/min离心5min,上清液合并至25mL比色管中,用乙腈定容至25.0mL,摇匀备用。
b) 净化

移取5.00mL样品溶液加至已活化的中性氧化铝柱上,用KD浓缩瓶接收流出液,4mL乙腈洗涤中性氧化铝柱,收集全部流出液,45℃旋转蒸发至约1mL,残液用乙腈定容至1.00mL,超声振荡5min, 加入1.0mL5mmol/L乙酸铵,超声振荡1min,样液经0.2μm滤膜过滤后供液相色谱-串联质谱测定。

2.2 加工水产品
c) 提取
称取5.00g已捣碎样品于100mL离心管中,加入200μL混合内标标准溶液,依次加入1mL 0.25g/mL盐酸羟铵溶、2mL 1.0mol/L对-甲苯磺酸溶液、2mL 0.1mol/L乙酸铵缓冲溶液和40mL乙腈,匀浆2min(10000r/min),离心3min(3000r/min),将上清液转移到250mL分液漏斗中,用20mL乙腈重复提取残渣一次,合并上清液。于分液漏斗中加入30mL二氯甲烷、35mL水,振摇2min,静置分层,收集下层有机层于150mL 梨形瓶中,再用20mL二氯甲烷萃取一次,合并二氯甲烷层,45℃旋转蒸发近干。
d) 净化
将中性氧化铝(Cleanert Alumina-N)串接在阳离子交换柱(Cleanert PCX)上方。用6mL乙腈分三次(每次2mL)涡旋溶解上述提取物,并依次过柱,控制Cleanert PCX柱流速不超过0.6mL/min,再用2mL乙腈淋洗Cleanert Alumina-N柱后,弃去。依次用3mL 2%(V/V)甲酸溶液、3mL乙腈淋洗Cleanert PCX柱,弃去流出液。用4mL 5%乙酸铵甲醇溶液(V/V)洗脱,洗脱流速为1mL/min,用10mL刻度试管收集洗脱液,用水定容至10.0mL,样液经0.2µm滤膜过滤后供液相色谱-串联质谱测定。