天津博纳艾杰尔科技有限公司

    双酚A，也称BPA，是世界上使用最广泛的工业化合物之一，主要用于生产聚碳酸酯（PC）、环氧树脂、聚砜树脂、聚苯醚树脂、不饱和聚酯树脂等多种高分子材料。也可用于生产增塑剂、阻燃剂、抗氧剂、热稳定剂、橡胶防老剂、农药、涂料等精细化工产品。正因为其应用广泛，所以日常生活它无所不在，如婴儿奶瓶、奶粉罐、塑纸杯、塑料水瓶、塑料餐盒、罐头食品和饮料的包装、眼镜镜片、玩具、医疗器械、收银单据用热敏纸等。

   但是众多体外实验和体内实验，双酚A被证实是一种内分泌干扰素，对动物具有潜在的雌激素效应，会影响生殖系统。 欧盟认为双酚A在加热时能析出到食物和饮料当中，它可能扰乱人体代谢过程，对婴儿发育、免疫力有影响，甚至致癌。欧盟从今年3月1日禁止生产含双酚A的塑料奶瓶，6月起禁止任何双酚A塑料奶瓶进口到成员国。

   本文研究建立了测定塑纸杯、奶瓶等食品接触材料中双酚Ａ的固相萃取-高效液相色谱法。

2.1主要仪器和试剂

高效液相色谱仪（Agilent 1260，Agilent 公司），带VWD检测器；Cleanert^TM PEP SPE 500mg/6mL（博纳艾杰尔科技）；Cleanert^TM C18 SPE 500mg/6mL（博纳艾杰尔科技）；SPE-10全自动固相萃取工作站（博纳艾杰尔科技），氮吹仪（博纳艾杰尔科技）；真空旋转蒸发仪；电子天平；超声波清洗机；涡旋混合器；

甲醇、乙腈均为色谱纯；乙酸、氨水均为分析纯；超纯水（符合实验室一级用水）；双酚A标准物质，纯度＞99.0%（美国Accustandard 公司）；双酚A储备液：称取适量的双酚A标准物质，用甲醇稀释配制成浓度为200μg/mL；双酚A上机液：用甲醇稀释200μg/mL双酚A储备液，配制成浓度为4.0，10，20，40μg/mL的标准溶液；双酚A 工作液：用水稀释200μg/mL双酚A储备液，配制成浓度为2.0μg/mL的工作液A。

2.2方法

称取一定量的样品，将其剪成5×5mm的小碎片，置于150ml的平底烧瓶中，加入100mL的甲醇，室温下超声提取2小时，过滤至250mL鸡心瓶，旋转蒸发至干，用5mL水漩涡洗脱。洗脱液过Cleanet^TM PEP SPE 固相萃取柱（5mL甲醇，5mL水活化好），用水淋洗柱子，真空抽干，用甲醇洗脱并收集。洗脱液经氮气吹干，用甲醇定容至1mL，作为待测品。                   

2.3 分析条件  

色谱柱：Venusil^TM ASB-C18色谱柱(4.6mm×150mm，5μm,150A)

流动相：V(乙腈 ）：V(水)=50:50

流速：1.0 mL／min

柱温：30℃

检测波长：230nm

进样量：2μL

3.1 标准溶液曲线

将配制好的双酚A浓度为4.0，10，20，40μg/mL的上机液进样进行HPLC分析。图1为10μg/mL标准溶液的色谱图，保留时间为4.00min，以目标物的峰面积y对目标物对应的浓度x作标准曲线，回归方程为：y=10.978x-1.9726(R²=1.0000)，方法线性良好。

3.2 固相萃取方法

选用了Cleanert^TM PEP SPE (500mg/6mL),Cleanert^TM C18 SPE (500mg/6mL)两种固相萃取柱对pH 值2、7、11的双酚A水溶液（分别准确取5.00 mL 2.0μg/mL工作液A于试管中，分别用乙酸，氨水调节pH至2、7、11）进行富集，并用对应pH的水（用乙酸，氨水调节至所需pH值）进行淋洗。最后用HPLC进行分析，得色谱图，如图2为pH=7条件下用Cleanert^TM PEP SPE处理后的色谱图。用液相方法进行定量，计算并比较回收率，结果列于表1中。

  表1 Cleanert^TM PEP SPE与Cleanert^TM C18 SPE 在不同pH值时对BPA的回收率

编号	固相萃取柱	上样及淋洗液pH值	回收率（*100%）
1	PEP	7	96.4
2	PEP	2	94.6
3	PEP	11	93.8
4	C18	2	93.8
5	C18	7	68.8

表1结果表明，Cleanert^TM C18 SPE柱在pH值7时，回收率为68.8%，远远低于pH值2时的93.8%。而Cleanert^TM PEP SPE柱在pH值 2～11时，对BPA的回收率都在90%以上，对样液与洗脱液的pH值要求不高，使得操作方便、快捷、准确，所以样品后续实验选用Cleanert^TM PEP SPE柱进行净化。

3.3 实际样品与样品加标回收

样品分别为一次性纸杯、矿泉水瓶、奶瓶。样品加标为在三个样品中添加10.0μg的双酚A，同样品一同按方法处理得。回收率分别为 93.4%，87.9%，89.7%。图3为一次性纸杯处理后的色谱图，图为4为一次性纸杯的加标回收的色谱图。

图3 一次性纸杯处理后的色谱图

         

图4 一次性纸杯的加标回收的色谱图

本论文主要阐明对食品接触材料中双酚A含量的固相萃取检测方法，综上所述，通过对部分食品接触材料中双酚A含量的检测及回收率的测试，可知该方法前处理简单、适用性强、方便快捷、回收率高，是检测食品接触材料中双酚A含量的高效方案。