1、实验目的
建立测定酱油及酱中的食品添加剂三氯蔗糖（蔗糖素）的前处理及液相测定方法
2、实验条件：
2.1前处理过程：
准确称取酱油（或者酱）5g（精确至0.001g），置于50ml的离心管中，加入5ml蒸馏水，涡旋振荡器上震荡3min后加入15ml甲醇，继续震荡30s，超声提取20min，3000r/min离心5min，将上清液移入50ml玻璃蒸发皿内。沉淀物加入10ml，75%甲醇水溶液，玻璃棒搅匀后，3000r/min离心5min，上清液合并于蒸发皿中。置于水浴锅上，在沸水浴上蒸干，残渣用水溶解并定容至5.00ml，过0.45μm滤膜（亲水膜货号：AS012545-T；尼龙膜货号：AS022545-T），置12/24位负压SPE装置(货号：VM12/VM24)，过中性氧化铝固相萃取柱(1g/6ml)（货号：AL0006-N），弃去初滤液2ml接受余下滤液，过0.45μm滤膜（亲水膜货号：AS012545-T；尼龙膜货号：AS022545-T），滤液待测。
2.2 色谱条件：
色谱柱：Venusil XBP C18-L（4.6×150mm，5µm 150Å）（订货号：VX951505-L）；
流速：1.0ml/min； 柱温：35℃； 进样量：30μl；
蒸发光散射检测器：蒸发管温度:75℃；气体流量2.5l/min
流动相梯度程序：
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时间/min
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水V/V
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乙腈V/V
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0
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89
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11
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13
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89
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11
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14
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10
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90
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21
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10
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90
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22
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89
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11
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25
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89
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11
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3、实验结果：
采用Cleanert Alumina N对酱油及酱进行处理，在吸附酱油及酱中芳香类及脂肪胺类等化合物的同时，有效的去除了样品中的其他杂质；采用XBP C18-L对酱油和酱中的三氯蔗糖进行分析，分离度较好。代表性色谱图如下：
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图1、三氯蔗糖标准品的色谱图
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图2、空白样品加样色谱图
图3 样品（酱油）色谱图