——《不同基质食品中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案》更新之一
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下：
1、样品提取方法：
纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。
其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。
2、固相萃取方法：
若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下：
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化；
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中；
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱；
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。
若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同上。
补充说明：
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。
附件一：
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS
色谱条件：
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
进样口：250℃，不分流进样
程序升温：50℃（1min）20℃/min 220℃（1min）5℃/min 280℃（4min）
进样量：1μL
流速：1 mL/min
质谱条件：
接口温度：280℃
电离方式：EI
电离能量：70eV
溶剂延迟：7min
监测方式：SIM模式，监测离子见下表
|
序号
|
保留时间/min
|
中文名称
|
英文缩写
|
定量离子
|
辅助定量离子
|
|
1
|
8.351
|
邻苯二甲酸二甲酯
|
DMP
|
163
|
77
|
|
2
|
9.228
|
邻苯二甲酸二乙酯
|
DEP
|
149
|
177
|
|
3
|
11.018
|
邻苯二甲酸二异丁酯
|
DIBP
|
149
|
223
|
|
4
|
11.788
|
邻苯二甲酸二丁酯
|
DBP
|
149
|
223
|
|
5
|
12.135
|
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
|
DMEP
|
59
|
149、193
|
|
6
|
12.857
|
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
|
BMPP
|
149
|
251
|
|
7
|
13.231
|
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
|
DEEP
|
45
|
72
|
|
8
|
13.605
|
邻苯二甲酸二戊酯
|
DPP
|
149
|
237
|
|
9
|
15.805
|
邻苯二甲酸二己酯
|
DHXP
|
149
|
104、76
|
|
10
|
15.97
|
邻苯二甲酸丁基苄基酯
|
BBP
|
149
|
91
|
|
11
|
17.436
|
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
|
DBEP
|
149
|
223
|
|
12
|
18.108
|
邻苯二甲酸二环己酯
|
DCHP
|
149
|
167
|
|
13
|
18.345
|
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
|
DEHP
|
149
|
167
|
|
14
|
18.511
|
邻苯二甲酸二苯酯
|
—
|
225
|
77
|
|
15
|
20.785
|
邻苯二甲酸二正辛酯
|
DNOP
|
149
|
279
|
|
16
|
23.379
|
邻苯二甲酸二壬酯
|
DNP
|
149
|
57、71
|
在上述色谱条件下，16种邻苯二甲酸酯类化合物的谱图如图1所示。
图1、 16种邻苯二甲酸酯类化合物选择离子色谱图
出峰顺序依次为：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)