随着现代食品工业的发展,人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等,采用了多种现代食品加工技术,但是不幸的是,由于种种原因,在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质,比如最近出现的食品中添加“塑化剂”邻苯二甲酸酯类物质。
以往,由于人们对邻苯二甲酸酯类的安全性认识不足,多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况,开发了一系列的检测方案,以供大家参考。
1.水性样品
样品处理:取10mL样品,进行固相萃取富集处理
固相萃取方法:
活化:5mL甲醇、5mL水
洗脱:5mL甲醇
检测:将洗脱液用氮气吹干后,以1mL甲醇定容,然后用液相色谱法检测。
说明:此法多适用于配套液相色谱检测,当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时,需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
一般来说,对于此类样品,可以采用正己烷液液萃取的办法,用GC/MS(灵敏度较高)直接检测。
2.低脂液体样品
此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理产品为Cleanert MAS-PAE管。
样品处理:向玻璃离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
检测:GC/MS检测。
3.低脂固体食品
此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等,推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
样品处理:取1g已制成粉末状的样品,2mL水,加入到Cleanert MAS-PAE离心管中,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
检测:GC/MS检测。
4.高脂样品
此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等,推荐前处理柱为Cleanert PAE。
4.1 动植物油脂样品的处理
检测:GC/MS检测。
4.2其他样品的处理
取样品0.5g,以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取,然后以4000rpm转速,离心5min,取上清液作为待净化液。若样品中含有水,视情况加入适量无水硫酸钠后,再进行上述操作。
检测:GC/MS检测。
5.复杂样品
此类样品多为油水混合态,同时添加有多种风味物质,成分比较复杂,包括方便面调味包,酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量,对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱,对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理,以方便面调味包为例:
检测:GC/MS检测。
5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理,以酱油为例
样品处理:向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲苯(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAEc填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
检测:GC/MS检测。
方法更新: 1. 含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
附件一:
高效液相色谱法检测16种邻苯二甲酸酯的含量
流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
Time/min
|
A/%
|
B/%
|
0
|
60
|
40
|
2
|
50
|
50
|
10
|
40
|
60
|
12
|
30
|
70
|
20
|
30
|
70
|
31
|
0
|
100
|
40
|
0
|
100
|
40.01
|
60
|
40
|
柱 温:30℃
图1 16种邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:25ppm)
表1 16种邻苯二甲酸酯标准曲线表
峰位置
|
标准曲线方程
|
R2
|
1
|
Y=24.99X+5.202
|
0.999
|
2
|
Y=17.84X+3.424
|
0.999
|
3
|
Y=24.21X+3.974
|
0.999
|
4
|
Y=14.03X+3.658
|
0.998
|
5
|
Y=24.21X+3.974
|
0.999
|
6
|
Y=17.51X+4.972
|
0.997
|
7
|
Y=17.22X+4.098
|
0.999
|
8
|
Y=18.67X-0.302
|
0.997
|
9
|
Y=12.66X-1.877
|
0.998
|
10
|
Y=14.38X+0.445
|
0.997
|
11
|
Y=15.35X+0.798
|
0.998
|
12
|
Y=11.46X+3.475
|
0.998
|
13
|
Y=13.52X+2.67
|
0.998
|
14
|
Y=9.915X+26.59
|
0.996
|
15
|
Y=10.61X-0.041
|
0.999
|
16
|
Y=9.404X+11.14
|
0.999
|
结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测16种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。
序号
|
保留时间/min
|
中文名称
|
英文缩写
|
SIM离子
|
1
|
8.265
|
邻苯二甲酸二甲酯
|
DMP
|
163、77
|
2
|
9.135
|
邻苯二甲酸二乙酯
|
DEP
|
149、177
|
3
|
10.888
|
邻苯二甲酸二异丁酯
|
DIBP
|
149、223
|
4
|
11.637
|
邻苯二甲酸二丁酯
|
DBP
|
149、223
|
5
|
11.979
|
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
|
DMEP
|
59、149、193
|
6
|
12.72
|
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
|
BMPP
|
149、251
|
7
|
13.044
|
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
|
DEEP
|
45、72
|
8
|
13.41
|
邻苯二甲酸二戊酯
|
DPP
|
149、237
|
9
|
15.552
|
邻苯二甲酸二己酯
|
DHXP
|
104、149、76
|
10
|
15.694
|
邻苯二甲酸丁基苄基酯
|
BBP
|
149、91
|
11
|
17.153
|
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
|
DBEP
|
149、223
|
12
|
17.81
|
邻苯二甲酸二环己酯
|
DCHP
|
149、167
|
13
|
18.056
|
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
|
DEHP
|
149、167
|
14
|
20.444
|
邻苯二甲酸二正辛酯
|
DNOP
|
149、279
|
15
|
22.98
|
邻苯二甲酸二壬酯
|
DNP
|
57、149、71
|
结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率
序号
|
保留时间/min
|
中文名称
|
英文缩写
|
回收率
|
1
|
8.337
|
邻苯二甲酸二甲酯
|
DMP
|
87.82%
|
2
|
9.214
|
邻苯二甲酸二乙酯
|
DEP
|
72.31%
|
3
|
10.996
|
邻苯二甲酸二异丁酯
|
DIBP
|
81.97%
|
4
|
11.759
|
邻苯二甲酸二丁酯
|
DBP
|
77.33%
|
5
|
12.11
|
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
|
DMEP
|
83.87%
|
6
|
12.864
|
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
|
BMPP
|
83.83%
|
7
|
13.201
|
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
|
DEEP
|
109.08%
|
8
|
13.576
|
邻苯二甲酸二戊酯
|
DPP
|
86.36%
|
9
|
15.757
|
邻苯二甲酸二己酯
|
DHXP
|
84.67%
|
10
|
15.923
|
邻苯二甲酸丁基苄基酯
|
BBP
|
98.33%
|
11
|
17.377
|
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
|
DBEP
|
101.30%
|
12
|
18.041
|
邻苯二甲酸二环己酯
|
DCHP
|
92.47%
|
13
|
18.28
|
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
|
DEHP
|
132.32%
|
14
|
20.718
|
邻苯二甲酸二正辛酯
|
DNOP
|
89.73%
|
15
|
23.303
|
邻苯二甲酸二壬酯
|
DNP
|
70.10%
|
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率
表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
序号
|
保留时间/min
|
中文名称
|
英文缩写
|
回收率
|
1
|
8.308
|
邻苯二甲酸二甲酯
|
DMP
|
149.97%
|
2
|
9.185
|
邻苯二甲酸二乙酯
|
DEP
|
93.49%
|
3
|
10.96
|
邻苯二甲酸二异丁酯
|
DIBP
|
125.70%
|
4
|
11.716
|
邻苯二甲酸二丁酯
|
DBP
|
136.89%
|
5
|
12.064
|
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
|
DMEP
|
90.84%
|
6
|
12.778
|
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
|
BMPP
|
82.29%
|
7
|
13.144
|
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
|
DEEP
|
106.38%
|
8
|
13.518
|
邻苯二甲酸二戊酯
|
DPP
|
88.14%
|
9
|
15.686
|
邻苯二甲酸二己酯
|
DHXP
|
75.32%
|
10
|
15.844
|
邻苯二甲酸丁基苄基酯
|
BBP
|
89.56%
|
11
|
17.295
|
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
|
DBEP
|
105.05%
|
12
|
17.967
|
邻苯二甲酸二环己酯
|
DCHP
|
72.94%
|
13
|
18.206
|
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
|
DEHP
|
124.27%
|
14
|
20.625
|
邻苯二甲酸二正辛酯
|
DNOP
|
78.19%
|
15
|
23.297
|
邻苯二甲酸二壬酯
|
DNP
|
75.27%
|