奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 \ |!\V  
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HPLC法： )"<8K}%!  
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色谱条件： RHY4P4B<v>  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； ;;U:Jtn2  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； [iS$JG-  
B：乙腈； ,xi({{L*  
A：B=10:90； c-4STPNQi  
检测波长：220nm； @%ECj)u`O  
进样量：10μL； gFN9jM  
柱温：30℃；  +cu^%CXT  
流速：1mL/min。 7<\C?`q"  
Kq6jw/T  
实验结果： ?h8{xa5b  
线性关系和检出限 Sm{>rR  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； $iw%
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分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： -0uV z)  
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名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

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?=Pd  
LC-MS/MS法： ?uLeFD  
I27,mS+]  
色谱条件： :3h{ A`u  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； y2L#:[8  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） &]6)
LFm  
B：乙腈 z9/G4^qF  
A：B=10:90 tl yJ mdl  
进样量：10μL； X@ N$Z{  
柱温：30℃； h!@,8y[B  
流速：0.2 mL/min。 /a9!Cf  
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tL(  
质谱条件 Rg&-0b  
质谱仪：API 4000+；  9Ru;`  
离子源：电喷雾离子源； gbBy/_b  
扫描方式：正离子扫描； |iYg >  
检测方式：多反应监测； B0}~G(t(  
CAD：8.00； M6|I6M <  
CUR：10.00； : 9!%ZD  
GS1：60.00； \kIMDg3}  
GS2：50.00； 5MTgK=c  
IS：5500.00； 0>Z ;Ni  
TEM：500.00。 mdih-u(T|  
'm=*u SJK  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

PaB!,<A  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。
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实验结果 ,8G{]X)  
线性关系和检出限 Y
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准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； uwIc963  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： =nUW'  
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名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图