奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 )nf%S+KV  
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HdtGyh6X0  
HPLC法： FJH>P\+  
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色谱条件： p_BG#dRM  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； )G/
=3;!  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； Ay6T*Nu`   
B：乙腈； o/
,%rA4  
A：B=10:90； *vBhd2H
O  
检测波长：220nm； :FSg %IUX  
进样量：10μL； uq:'`o-1  
柱温：30℃； lKI]q<2  
流速：1mL/min。 35-FD{  
\hzx?  
实验结果： U8g?   
线性关系和检出限 hU2N{Ac  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； R?%|RCht1  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： ]zK} X!  
~yf5$~Z  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

-)<Nd:A  
*AN#D?X
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?^ +|V,<
 
LC-MS/MS法： C]XD
Dr  
%?$"oWmenS  
色谱条件： pVY.&XBZ$  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； !14z4]b  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） b
+_E)4  
B：乙腈 !]nCeo  
A：B=10:90 $9~1s/('  
进样量：10μL； *Y ZLQT  
柱温：30℃； 7w*&Yg]  
流速：0.2 mL/min。 2LU'C,o?  
E6k&r}  
质谱条件 `WS_*fJ5  
质谱仪：API 4000+； KCE-6T  
离子源：电喷雾离子源； Cl!jK^AbG  
扫描方式：正离子扫描； m?$G(E5  
检测方式：多反应监测； qXhf?x  
CAD：8.00； 6RQCKN)  
CUR：10.00； X3iRR{< @  
GS1：60.00； yi-"hT`  
GS2：50.00； _QUu'zJ  
IS：5500.00； 5J\|gZQF  
TEM：500.00。 m#'rI=}!  
NRuG?^/}d  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

Vkvb=  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 Ux)p%-  
*n*N|6+  
实验结果 +>!B(j\gx  
线性关系和检出限 Vh#Mp!  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； }ED nLou  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： J~iOP  
J+}+"h~.  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图