奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 _P,fJ`w  
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HPLC法： /A|ofAr)  
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色谱条件： )c]GgPH  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； 7lR(6ka&/  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； L!mQP  
B：乙腈； pOIFO=k  
A：B=10:90； pfZn<n5p  
检测波长：220nm； 'qQDM_+  
进样量：10μL； C(e!cOG  
柱温：30℃； N4)&K[  
流速：1mL/min。 jqb,^T|j;m  
OEdp:dW|  
实验结果： ]
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J  
线性关系和检出限 I?bL4u$\  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； 4sNM#]%|  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： *Vv ;NA/  
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名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

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m='+->O*'l  
O!Mm~@MoA  
LC-MS/MS法： >a_K:O|AJ  
{oBVb{<  
色谱条件： NmOQ7T  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； ~X`vRSrH  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） *zz/U (9D  
B：乙腈 ,ZMYCl]  
A：B=10:90 d=lZhqY  
进样量：10μL； nqiy)ZN#R  
柱温：30℃； @H7dQ,%  
流速：0.2 mL/min。
MKoN^(7  
:V+t|@m5l  
质谱条件 >A2& Mjo  
质谱仪：API 4000+； .JQR5R |Q  
离子源：电喷雾离子源； "uZ'oN  
扫描方式：正离子扫描； i}+dctg/  
检测方式：多反应监测； QbOmJQ  
CAD：8.00； #-e3m/>  
CUR：10.00； EWH'x$z_q  
GS1：60.00； \%^<Ll  
GS2：50.00； Jc{zi^)(EN  
IS：5500.00； @["Vzg!I6"  
TEM：500.00。 nwO;>Qr  
.>CqZN,^  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

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注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 -R6z/P(}  
xwK<f6H!y  
实验结果 #c?\(qjWA  
线性关系和检出限 0 w@~ynW[  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； A:
NsDEt  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： N15{7,   
TioI$?l>W(  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图