一、实验目的 e&MC|US=\ 建立白酒中塑化剂的前处理和检测方法,使用Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱)富集白酒这类极性基质中的邻苯二甲酸酯类物质,建立固相萃取方法,以期得到优良的加标回收率,保证检测结果的准确性。 e&ANp0|W uUE9g 二、仪器及材料 $&|y<Y= 材料:白酒;纯化水,16种邻苯二甲酸酯(PAEs)混标1ppm;Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱管);玻璃移液管;洗耳球;烧杯 U(&oj e 仪器:Agilent GC/MS 7890-5075c,Agilent HPLC1200,氮吹仪 e]ig
!G] QYXx:nIrg 三、实验过程 1{pmKPu 注意事项:实验过程中,试剂及容器必须为玻璃,尽量避免接触塑料制品。 tc_f;S`k 甲醇和乙酸乙酯必须是进口色谱纯。 C`oa3B,z 3.1 溶液配制 Qz<d~N (1)将白酒用去离子水稀释,使其中的乙醇的含量为5%。 h>
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-, 例如:某种白酒含酒精52%,那么取9.6mL白酒,用去离子水稀释定容至100mL,即可得5%的酒精含量的样品液。 n[xkSF^) (2)取1mL甲醇加入19mL去离子水,混匀,得到5%甲醇水溶液,为淋洗液。 xc
1A$EY 3.2 固相萃取 "vF
MSY 活化:用玻璃移液管分别取5mL乙酸乙酯、5mL甲醇,5mL水,在重力状态下依次过柱; yFIy`9R 上样:用玻璃移液管取100mL样品液加到柱上; $FM'
3%B[ 淋洗:用玻璃移液管取5mL 5%甲醇/水溶液淋洗固相萃取柱。 8Vl!|\x5 淋洗结束之后,开启真空泵,抽20min,抽干之后,加入2mL甲醇浸泡柱床约1min; ,+/zH'U} 洗脱:用10mL乙酸乙酯洗脱固相萃取柱,收集洗脱液。 >O{7/)gS^ 将洗脱液分别于35℃氮吹至干,用1mL甲醇定容,将溶液转移至进样样品瓶,进行GC/MS或HPLC检测,具体检测方法参见附录1及附录2。 <dR,' `_AM` >_ 四、实验结果及结果分析 {XY3Xo 取2份10mL含5%酒精的白酒样品溶液,各加入1ppm邻苯二甲酸酯类混标100μL,按照上述方法进行操作和GC/MS检测,得到的色谱图见图1,回收率数据见表1. gtU1'p" 4.1 实验谱图图1加标样品洗脱液色谱图(定容浓度为100ppb)
ija:H'j 4.2 实验数据 I@Z)<5Zf
表1 回收率数据
mN1Ssq"B Q_P5MLU> 注意:邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯是使用非常普遍的增塑剂,广泛的存在于环境中,因而测试时十分容易造成背景过高的干扰问题。尤其需要注意的是氮吹时,使用的氮吹仪,应该是专用的仪器,而且必须定期用进口色谱纯的乙酸乙酯清洗氮吹的针头。 9{eBgdC 附录1 GC/MS法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物
d79N-O- 仪器:Agilent 7890/5975c GC/MS :c4kBl%gJ ~mH+DV3
色谱条件: hZuYdV{'h *T4ge|zUc 色谱柱:DA-5MS(30m*0.25mm*0.25μm)(订货号:1525-3002);进样口:250℃,不分流进样; T-P@u-DU 进样量:1μL;程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min); Kym:J \}9B 流速:1 mL/min。质谱条件: r<(kLpOH% 4(m3c<'P 接口温度:280℃;电离方式:EI; &7F&}7*c 电离能量:70eV;溶剂延迟:7min; A_Gp&acs$ 监测方式:SIM模式,监测离子见表2。 zjWyGt(Q
表2 16种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及定性离子
YD+QX@ 图2 100ppb标样色谱图 "j;!_v>=f`
表3 16种邻苯二甲酸酯类化合物GC/MS检测标准曲线表
CCwK8`% 6P6Jx; 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足16种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。 oPE.gn_$ 附件2 HPLC法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物 :'TX"
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色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
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表4 梯度洗脱表
流 速:1.0 mL/min
波 长:242 nm
进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
样 品:16种邻苯二甲酸酯
浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
溶 剂:正己烷 /40%流动相A
柱 温:30℃
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图3 16种邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:25ppm)
;%lJD"yF (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯DNOP,邻苯二甲酸二苯酯,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯DINP)
y;*My# 表5 16种邻苯二甲酸酯类化合物HPLC检测标准曲线表
结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测16种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。