一、实验目的 Y'u7 IX} 建立白酒中塑化剂的前处理和检测方法,使用Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱)富集白酒这类极性基质中的邻苯二甲酸酯类物质,建立固相萃取方法,以期得到优良的加标回收率,保证检测结果的准确性。 oM)h#8bq Dgql?+2$ 二、仪器及材料 ?|1Mv1C? 材料:白酒;纯化水,16种邻苯二甲酸酯(PAEs)混标1ppm;Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱管);玻璃移液管;洗耳球;烧杯 Ln.ZVMZ; 仪器:Agilent GC/MS 7890-5075c,Agilent HPLC1200,氮吹仪 7JDN{!jT <N(oDa U 三、实验过程 o3Vn<Z$/Cl 注意事项:实验过程中,试剂及容器必须为玻璃,尽量避免接触塑料制品。 ZCVl5R(mZ 甲醇和乙酸乙酯必须是进口色谱纯。
Q2p)7G 3.1 溶液配制 f{lZKfrp (1)将白酒用去离子水稀释,使其中的乙醇的含量为5%。
}sxn72, 例如:某种白酒含酒精52%,那么取9.6mL白酒,用去离子水稀释定容至100mL,即可得5%的酒精含量的样品液。 `*\{.;,]# (2)取1mL甲醇加入19mL去离子水,混匀,得到5%甲醇水溶液,为淋洗液。 L fl-!1 3.2 固相萃取 &,i~ cG? 活化:用玻璃移液管分别取5mL乙酸乙酯、5mL甲醇,5mL水,在重力状态下依次过柱; 8@M'[jT 上样:用玻璃移液管取100mL样品液加到柱上; Ae?e 70bY 淋洗:用玻璃移液管取5mL 5%甲醇/水溶液淋洗固相萃取柱。 \NX Q 淋洗结束之后,开启真空泵,抽20min,抽干之后,加入2mL甲醇浸泡柱床约1min; qd!#t] 洗脱:用10mL乙酸乙酯洗脱固相萃取柱,收集洗脱液。 ex?\c" 将洗脱液分别于35℃氮吹至干,用1mL甲醇定容,将溶液转移至进样样品瓶,进行GC/MS或HPLC检测,具体检测方法参见附录1及附录2。 3SARr>HRyI [.q(h/b 四、实验结果及结果分析 (G4'(6 取2份10mL含5%酒精的白酒样品溶液,各加入1ppm邻苯二甲酸酯类混标100μL,按照上述方法进行操作和GC/MS检测,得到的色谱图见图1,回收率数据见表1. C>*n9l[M~ 4.1 实验谱图图1加标样品洗脱液色谱图(定容浓度为100ppb)
K!b8= K` 4.2 实验数据 {rPk3
表1 回收率数据
F14(;'Az p^8JLC 注意:邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯是使用非常普遍的增塑剂,广泛的存在于环境中,因而测试时十分容易造成背景过高的干扰问题。尤其需要注意的是氮吹时,使用的氮吹仪,应该是专用的仪器,而且必须定期用进口色谱纯的乙酸乙酯清洗氮吹的针头。 SOH%Q_ 附录1 GC/MS法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物
QUPf*3Oy 仪器:Agilent 7890/5975c GC/MS .Qfnd# M*H<
n* 色谱条件: ^vn\4 $vqU|]J` 色谱柱:DA-5MS(30m*0.25mm*0.25μm)(订货号:1525-3002);进样口:250℃,不分流进样; u6p5:oJj, 进样量:1μL;程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min); )ZN(2z 流速:1 mL/min。质谱条件: ;n`
$+g:> }U(\~
=D 接口温度:280℃;电离方式:EI; )F
+nSV; 电离能量:70eV;溶剂延迟:7min; v;Swo(
" 监测方式:SIM模式,监测离子见表2。 o*-h%Z.
表2 16种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及定性离子
P/C&R-{') 图2 100ppb标样色谱图 +fC#2%VnU
表3 16种邻苯二甲酸酯类化合物GC/MS检测标准曲线表
z0T`5NG@ R2Twm!1 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足16种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。 9X
5*{f Y 附件2 HPLC法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物 XX]5T`D
色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
ke3HK9P;
表4 梯度洗脱表
流 速:1.0 mL/min
波 长:242 nm
进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
样 品:16种邻苯二甲酸酯
浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
溶 剂:正己烷 /40%流动相A
柱 温:30℃
.jU|gf:x
图3 16种邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:25ppm)
*kX3sG$8 (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯DNOP,邻苯二甲酸二苯酯,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯DINP)
s,UN'~
e1 表5 16种邻苯二甲酸酯类化合物HPLC检测标准曲线表
结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测16种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。