酱油中氯丙醇含量的测定 气相色谱质谱法 [复制链接]

|-zwl8E  
前言 {tE/Jv $  
   氯丙醇（Chloropropanols）是是一种在化学制作豉油的过程中所产生的毒性致癌物，同时具有抑制雄性激素生成的作用，使生殖能力减弱。对人体危害极大。日常比较常见的为以下三种：1-氯-2-丙醇 （ClCH2CHOHCH3）；3-氯-1,2-丙二醇 （3-MCPD）及1,3-二氯-2-丙醇 （1,3-DCP）。 ~?}/L'q!b  
   本文参考《GB/T 5009.191-2006 食品中氯丙醇含量的测定》，进行了酱油中3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）的测定，优化改进了用于样品预处理的硅藻土材料，调整活度，成功开发了Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱，结果表明满足实验要求，并大大简化了材料预处理过程，提高工作效率。 !40t:+I  
4:}`X  
1        仪器及材料 ,h2q37  
仪器：Agilent GC-MS 7890-5975c；涡旋混合器；超声仪；氮吹仪；恒温箱。 KrkZv$u,  
材料： 3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）标准品；乙酸乙酯、丙酮、正己烷为色谱纯；七氟丁酰基咪唑；无水硫酸钠；超纯水；氯化钠。 s8|#sHT  
固相萃取柱：Cleanert<sup>®</sup> MCPD （氯丙醇专用柱），2.5g/12mL,P/N:LBC250012 S'-<p<;D\B  
2        实验方法 +29;T0>a  
2.1 标准溶液配制 y`Pp"!P"O  
准确称取0.1g氯丙醇标准品于100mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容到刻度，得到浓度为1mg/mL的储备液。用丙酮将储备液逐渐稀释，得到1μg/mL标准工作液。 eq/5$b(  
2.2 饱和氯化钠溶液 }WGi9\9T&  
称取氯化钠290g，加水溶解并稀释至1000mL，超声20min。 , m|9L{  
2.3 GC-MS操作条件 lO $M6l  
H5RHA^p|  

g&0GO:F`   色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm		}2c}y7B,_   进样口：230℃，不分流进样
^YIOS]d>8#   程序升温：50℃（1min）2℃/min 82℃		18A&[6"!   进样量：1μL
UiZ61lw   流速：1 mL/min	ESrWRO f9   接口温度：250℃	&yA<R::o   电离方式：EI
x b0 +4w|   电离能量：70eV	GO)rpk9   溶剂延迟：7min	-.*\J|S@g   离子源：230℃
3QHZC0AY   四级杆：150℃	j d81E   检测模式：选择离子检测，SIM离子：253/275/289/291/453

K`X2N  
2.4 样品处理 ;?o C=c  
+-nQ, fOV  
称取2.5g酱油直接上样Cleanert<sup>®</sup> MCPD固相萃取柱，静置平衡10min，用15 mL乙酸乙酯洗柱，收集洗脱液。将洗脱液在35℃下氮气吹至近干（不可全干）。加入2 mL正己烷，摇匀，快速加入50μL七氟丁酰基咪唑，将样品瓶拧紧，涡旋20秒，将样品瓶置于70℃恒温箱中反应30min，取出冷却至室温，向样品瓶中加入2 mL饱和氯化钠溶液，涡旋1min，静置2min，取上层有机相至另一干净的样品瓶中，重复1次洗涤操作以除去杂质。将有机相经少量无水Na2SO4除水后转移至进样样品瓶中，待GC-MS检测 -0X> y  
3        实验结果 (>K$gAQH  
3.1 标准溶液色谱图 X2uX+}h*tA  
在GC-MS操作条件下（4），得到标准溶液色谱图如图1. 1pb;A;F,A  
3.2 样品色谱图 jVINc=o  
准确称取6份酱油，其中5份分别加入浓度为1μg/mL的标准溶液0.1mL，按照样品处理方法（5），将6份样品进行净化衍生，得到酱油样品加标色谱图及酱油样品色谱图如图2、图3. ^JtHTLH
L=  
'D&G~$  
图3 酱油样品色谱图 uC(S`Q[Bg  
3.3 加标回收率及精密度 %5*#c*)R  
4        结论 

-mJ&N  
实验结果表明，Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱适用于酱油中氯丙醇的预处理，能净化酱油样品，实验加标回收率及RSD能满足定量实验的要求。本实验方案与国标方法相比更简便，使用的化学试剂量仅为国标方法的1/20，有利于操作人员的身体健康及环境；实验时间较国标方法短，更加适合于大批量酱油样品的前处理。