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肉类中激素检测-免疫分析法 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2023-07-14
关键词: 肉类激素检测

免疫分析是利用抗原与抗体的特异性结合反应为基础的分析技术,以抗体为核心试剂,具有高选择性、高灵敏度等特点。免疫分析在动物激素类药物残留分析中有广泛的应用前景,已经渗透到激素类药物残留分析的各个坏节。免疫分析法包括酶联免疫分析法、放射免疫分析法和荧光免疫分析法,这三种方法特异性强,灵敏度高(可达10-12g),操作简单易行,条件要求不高,然而抗体缺乏高灵敏试剂所具有的分析信号反差,其假阳性很高。

1酶联免疫分析法(ELISA)

酶联免疫分析法是免疫分析法中应用最广泛的一种分析方法。海赛群生物科技有限公司生产的丁胺醇残留酶联免疫试剂盒平均检测下限JJO.Ing/g,同收率75%-105%.宓晓黎等“砌自制盐酸克仑特罗酶联免疫试剂盒在12.5-O.lng/ml范围内线性关系良好,相关系数JJ0.9980,灵敏度达O.lng/ml;孙俐建立了对肉类食品中二苯乙烯类激素残留最酶联免疫定量检测方浩,己烷雌酚同收率90.1%-94%,己烯雌酚同收率达80.1%-86.3%,精密度已烷雌酚为5.4%-8.0%,己烯雌酚为7.2%-10.6%,该方法可以满足动物源性食品残留监控的要求,也适应国内外对肉类研究二苯乙烯类激素残留的测定要求。

2放射免疫分析法(RIA)

它是生物化学中的免疫分析,加卜放射性“标记”,创立的一种新的生物化学分析方法。它对十测定极其微最的生物活性物质具有独到的优越性,解决了以往的化学分析、生化分析和仪器分析解决不了的超微最分析的难题,样品处理简单,放射免疫法分析法不仅保留了免疫反应的高度精密的专一性,而且又引入了放射性分析的高度灵敏性,其灵敏度可达10-9-10-12,Elizabeth等用RIA试剂盒测定测定牛肝中的盐酸克仑特罗,盐酸克仑特岁在Ing/g和2.5ng/g时平均同收率}J95%士15%和89%士9%。虽然放射免疫法分析法有很好的特异性和灵敏度,但是其半衰期较短,且有少量辐射,限制了它的广泛应用。

3荧光免疫分析法(FIA)

在20世纪40年代就有用荧光素来标记抗原或抗体,FIA的方法有很多,如底物标记荧光免疫分析法、荧光俯振免疫分析法(FPIA),以及现有免疫方法中灵敏度最高的时问分辨免疫分析法(TRFIA)等。TRFIA是20世纪80年代初Pettersson等和Eskola等创立的一种非放射性标记免疫技术,与传统的荧光素标记不同,它是以镧系元素,如铕(Eu)、铽(Tb)、钐(Sm)和铌(Nd)等标记抗体,因此又称为“解离一增强镧系荧光免疫分法”(DELFIA),利用时间分辨荧光仪特定的延迟一段时间测最,获得Eu+的特异荧光信号,几乎能够完全消除各种非特异性荧光物质的干扰,并且实现了分析方法灵敏度的突破,灵敏度可高达10-19mol/L。FIA-次能测定多个样品,但是它对温度依赖性强,荧光强度取决十激发波长。SmallBC等‘211用TRFIA技术测定鱼中的生长激素检出限为0.2ng/ml,同收率人十90%。

  

文章出自: 世科网

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