[毒素/微生物]食品与饮用水中诺如病毒检测 [复制链接]

诺如病毒（Norovirus）又称为诺罗病毒、诺沃克病毒或脓融病毒，是一组杯状病毒属病毒，其原型株诺瓦克病毒（Norwalk-like viruses）于1968年在美国诺瓦克市被分离发现。诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。感染者发病突然，主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。诺如病毒是全球流行性与散发性腹泻的主要病原之一，感染对象主要是成人和学龄儿童，寒冷季节呈现高发，受污染的食品、水源是诺如病毒传播的重要污染源，例如贝类、水果、蔬菜、饮用水、水源水等。

       目前，中国在食品与水样中诺如病毒检测方面还没建立相关国家标准。据文献报道，诺如病毒的检测方法主要包括电镜法、免疫法及分子扩增法（主要为PCR方法），其中分子扩增方法被认为是食品中检测诺如病毒的唯一方法（其他两种方法灵敏度差），而PCR则为“金标准”而被广泛作地采用。因此，完整的食品与水样中诺如病毒检测的主要流程共包括病毒的提取、核酸的纯化以及病毒的分子检测。

事件案例:

世界上很多地区都有诺如病毒暴发的案例，近年有更加频繁的趋势。

案例一：2010年广州从化因为水污染引起的诺如病毒感染事件，共有429人发病。

案例二：2012年9月底，德国首都柏林以及东部三个地区1万多名小学生和托儿所的幼儿发生疑以诺如病毒食物中毒。

案例三：2012年12月，日本各地接连发生一系列因诺如病毒而引起的集体食品中毒事件，从爱知县名古屋市一直到广岛县广岛市总的中毒人数1809人。

案例四：2014年，嘉兴市海宁、海盐两地部分学校陆续出现聚集性师生恶心呕吐腹泻等症状，经当地疾控中心检测，确定为诺如病毒感染，多名师生因此就医。

检测标准：

SN/T 3841-2014 出口贝类中诺如病毒和星状病毒的快速检测

本标准将于2014年8月1日实施。

SN/T2730-2010 进出口食品中诺如病毒检测酶联免疫吸附法

本标准规定了进出口食品中诺如病毒的酶联免疫吸附试验检测方法。

本标准适用于进出口贝类、鱼类、禽肉及其加工品的诺如病毒筛选检测。

SN/T 2626-2010 国境口岸诺如病毒检测方法

本标准规定了国境口岸诺如病毒检测的生物安全要求、检测对象、检测方法、结果的报告和阳性结果的处置。

本标准适用于国境口岸人群、可疑食物中诺如病毒的检测。

原理与步骤:

1、实验原理

    挑取被检样本或者被检样本中病毒易富集部位(例如贝类的消化腺组织)，通过蛋白酶K消化的方法解离病毒，然后通过异硫氰酸胍等试剂纯化病毒RNA，接下来继续将病毒RNA进行反转录，最后将产物cDNA进行PCR检测。

2、实验步骤

食品前处理→蛋白酶K消化→蛋白酶K消化→反转录→PCR检测→对照设置

文章出自: 世科网